外泌體衍生物的應用

 近期市場研究報告預測到2030年全球外泌體研究市場規(guī)模和份額需求將達到 18.96億美元,，說明外泌體具有巨大的市場潛力和行業(yè)認可度,。 由于外泌體的體積較小 一般為(30–100 nm) ,，所以外泌體的準確定量和表征在技術上是具有挑戰(zhàn)性的人,。目前,，已經(jīng)開發(fā)并應用了許多技術來克服這些挑戰(zhàn),。納米粒子跟蹤分析 (NanoSight) 技術就是用于外泌體大小和定量主要方法之一,。比如：Nanocoulter Ⅰ納米粒度儀采用了新一代電學原理 可以同時進行納米粒子或外泌體的單顆粒檢測，顆粒粒徑大小測量,、濃度測定,、 zeta電位標定、形態(tài)多維度檢測等廣泛用于外泌體的分離和純化過程中,。
外泌體的物理表征方法
     常用的外泌體物理表征方法是基于顯微鏡的方法,，例如透射電子顯微鏡、掃描電子顯微鏡,、低溫電子顯微鏡和原子力顯微鏡 ,；動態(tài)光散射 ,；納米粒子跟蹤分析；可調(diào)電阻脈沖傳感,；和單個 EV 分析等,。
    用于分析外泌體濃度,、定量和概況的分子生物方法主要包括：實時定量PCR,、數(shù)字 PCR技術（基于芯片的 dPCR、液滴數(shù)字 PCR,、ddPCR）,、蛋白質(zhì)免疫印跡、全基因組測序（ next-generation sequencing）,、exome-targeted sequencing（下一代測序）,、微陣列圖譜技術和ELISA技術等。

外泌體衍生物 miRNA 的重要應用
 miRNA 的靈敏生物標志物測定法主要用于檢測早期階段 (0-1) 腫瘤的存在,。除了基于組織活檢的當前研究外,，循環(huán) miRNA 的研究是生物標志物研究中一個新的擴展領域，因為它們具有所有特征（miRNA 分析,、診斷,、預后、治療反應和預測性生物標志物）,，可在液體活檢（生物體液）中檢測到, 并且不需要對病人進行健康和腫瘤活檢,。血液樣本等體液分析檢測使醫(yī)生和研究人員能夠及早了解癌癥的發(fā)展狀況。
miRNA 被稱為基因表達的基本調(diào)節(jié)因子,，尤其是在癌癥中,，并且在腫瘤發(fā)生、轉(zhuǎn)移和對各種療法的耐藥性中發(fā)揮重要作用,。據(jù)報道,，哺乳動物細胞每個細胞含有大約 100,000 個內(nèi)源性 miRNA 分子。據(jù)估計,，單個外泌體最多可攜帶約 500 個 miRNA 拷貝,。正常人血液中的外泌體量在癌癥患者中約為 10 ⁹個外泌體 /ml 。
 miRNA 是一類主要的小分子,、單鏈,、非編碼 RNA 分子，其成熟形式的長度在 20 到 22 個核苷酸 (NT) 之間,，在幾乎所有生物途徑中發(fā)揮重要作用,，包括細胞生長、增殖,、分化,、免疫反應,，細胞凋亡，代謝和腫瘤發(fā)生,。
外泌體在體液中的主要作用是可以保護 miRNA ,，防止其生物分子在非生理條件下（多次凍融循環(huán)、長期儲存和 pH）降解,。據(jù)報道,，外泌體來源的 miRNA 在 -20 ° C下可保持穩(wěn)定長達5年，并且對凍融循環(huán)具有抵抗力. 這也使外泌體成為癌癥和其他疾病的潛在生物標志物,。miRNA 與包括癌癥在內(nèi)的許多疾病的發(fā)病機制有關,，并且還被證明被遠端或附近的受體細胞吸收作為外泌體中的貨物，作為細胞間通訊的一種方法,，可能會影響發(fā)病機制 ,。所以，外泌體可以被看作是 miRNA 轉(zhuǎn)移至目標受體細胞的載體,。外泌體保護 miRNA 免于降解,，使它們比游離 miRNA 更穩(wěn)定，并能被特定受體細胞有效整合,。因此,，在外泌體攜帶的貨物中，miRNA 可以提供有關它們來源的細胞類型,、靶標和細胞狀態(tài)的身份信息,。
越來越多的證據(jù)表明，腫瘤細胞來源的外泌體已成為通過傳遞癌 miRNA 促進腫瘤細胞增殖,、侵襲,、血管生成、遠處轉(zhuǎn)移和腫瘤微環(huán)境重塑的主要候選者,。血管生成對于惡性腫瘤的生長和轉(zhuǎn)移至關重要,，因為新血管可以提供額外的氧氣和營養(yǎng)物質(zhì)，還可以清除廢物 ,。 比如：癌細胞釋放外泌體exo-miR-21,、exo-miR-23；外-miR-29,；exo -miR-103 和 exo-miR-210可以促進增殖,、血管生成和腫瘤轉(zhuǎn)移。
如今,，雖然已在各種細胞類型釋放的外泌體中找到 2838 種 miRNA,。但是還是需要進一步的研究來更好地了解外泌體 miRNA 作為生物標志物在癌癥中的作用。
     增強的外泌體純化有利于下游分析,，包括更準確的囊泡定量和表征,。蘇州阿爾法生物提供了熒光顯微鏡,、納米粒度儀 、酶標儀等實驗室儀器廣泛用外泌體分離,、外泌體純化,、外泌體物理等外泌體研究。我們?yōu)槟峁┮徽臼讲少彿辗桨?，同時也相信我們的服務會讓您的項目事半功倍,。