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PCR技術(shù),，即聚合酶鏈反應(yīng)（polymerase chain reaction,，PCR）是由美國PE Cetus公司的Kary Mullis在1983年（1993年獲諾貝爾化學(xué)獎）建立的,。這項技術(shù)可在試管內(nèi)的經(jīng)數(shù)小時反應(yīng)就將特定的DNA片段擴(kuò)增數(shù)百萬倍,，這種迅速獲取大量單一核酸片段的技術(shù)在分子生物學(xué)研究中具有舉足輕重的意義,，推動了生命科學(xué)的研究進(jìn)展,。它不僅是DNA分析常用的技術(shù),，而且在DNA重組與表達(dá)、基因結(jié)構(gòu)分析和功能檢測中具有重要的應(yīng)用價值,。
PCR可以被認(rèn)為是與發(fā)生在細(xì)胞內(nèi)的DNA復(fù)制過程相似的技術(shù),，其結(jié)果都是以原來的DNA為模板產(chǎn)生新的互補(bǔ)DNA片段。細(xì)胞中DNA的復(fù)制是一個非常復(fù)雜的過程,。參與復(fù)制的有多種因素,。PCR是在試管中進(jìn)行的DNA復(fù)制反應(yīng)，基本原理與細(xì)胞內(nèi)DNA復(fù)制相似,，但反應(yīng)體系相對較簡單,。
PCR由變性--退火--延伸三個基本反應(yīng)步驟構(gòu)成：
①模板DNA的變性：模板DNA經(jīng)加熱至94℃左右一定時間后，使模板DNA雙鏈或經(jīng)PCR擴(kuò)增形成的雙鏈DNA解離,，使之成為單鏈,，以便它與引物結(jié)合，為下輪反應(yīng)做準(zhǔn)備,。
②模板DNA與引物的退火(復(fù)性)：模板DNA經(jīng)加熱變性成單鏈后,，溫度降至55℃左右，引物與模板DNA單鏈的互補(bǔ)序列配對結(jié)合,。
③引物的延伸：DNA模板--引物結(jié)合物在Taq酶的作用下,，以dNTP為反應(yīng)原料，靶序列為模板,，按堿基配對與半保留復(fù)制原理,，合成一條新的與模板DNA 鏈互補(bǔ)的半保留復(fù)制鏈。
重復(fù)循環(huán)變性--退火--延伸三過程,，就可獲得更多的“半保留復(fù)制鏈",，而且這種新鏈又可成為下次循環(huán)的模板。每完成一個循環(huán)需2～4分鐘,，2～3小時就能將待擴(kuò)目的基因擴(kuò)增放大幾百萬倍,。
水稻內(nèi)源基因SPS核酸檢測試劑盒熒光PCR法用于檢測氣管分泌物拭子、肺組織等樣本中的水稻內(nèi)源基因SPS,，用于水稻內(nèi)源基因SPS感染的輔助診斷,，其檢測結(jié)果僅供參考。
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