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色譜是一種分離分析手段,，分離是核心，因此擔負分離作用的色譜柱是色譜系統(tǒng)的心臟,。對色譜柱的要求是柱效高,、選擇性好，分析速度快等,。
選購色譜柱一定要認真看待,，即使都是C18柱，不同品牌,、同一品牌不同系列都有不同的功能,，有能耐受低pH值的、有耐高溫的,、有適合堿性樣品的等等,。
原則一：看物理性質(zhì)
柱長，內(nèi)徑,，如250*4.6mm,。一般柱長在2—250mm，柱越長,，分離度越高,，但柱壓更高，分離所需時間更長;但分離度與理論塔板數(shù)的平方根成正比，所以一昧增加柱長并不是有效的分離手段,，一般情況下,，150mm、5um的填料可以提供足夠的塔板數(shù),。
粒徑,，影響色譜分離度。粒徑越小,，分離越快,，柱效越高，但柱壓力越高,，柱容易被污染,，導致柱壽命降低。常見分析柱通常使用5um填料,，復雜的多組分樣品分離一般使用3.5um粒徑,，更大內(nèi)徑的制備色譜柱通常使用更大的粒徑。如果固定相選擇是正確,，但是分離度不夠,，那么選用更小的粒度的填料是很有用的。3.5um填料填充柱的柱效比相同條件下的5um填料的柱效提高近30%;然而,，3.5um的色譜柱的背壓卻是5um的2倍,，因此如何選擇填料粒徑需要根據(jù)現(xiàn)實情況而定。
孔徑,，60A,，100A，120A,，300A等,。孔徑小,，則含孔率高,，比表面積大，載碳量高;色譜柱填料孔徑大小需和分子大小相匹配,，保證分子自由進出填料孔并與孔內(nèi)表面的鍵合相進行分離分配,，通常要求孔徑直徑是分子直徑的3倍以上，一般小分子使用80—120A,，大分子使用300A,。
顆粒形狀，一般有球形和不規(guī)則形,，當使用黏度較大的流動相時,，球形顆粒可以降低柱壓,，延長色譜柱壽命,。
比表面積，指的是每克填料的表面積,，如180m2/g—350m2/g,，與粒度和含孔率有關；比表面積大,，會增加樣品與鍵合相之間的反應,，增加保留和分離度；比表面積小則可以縮短分析時間和平衡時間,，并不是比表面積大或者小就更好,，需要選擇合適的比表面積。
原則二：看化學性質(zhì)
硅膠基質(zhì)：通用的基質(zhì),，強度大,，化學修飾容易，但使用的pH值范圍有限(一般為2—8,，特殊修飾的可以達到1—12),。
聚合物基質(zhì)：多為聚苯乙烯—二乙烯基苯或聚甲基丙烯酸脂，化學穩(wěn)定,，應用pH范圍寬,，具有更強的疏水性，對蛋白質(zhì)等樣品分離效果較好,；但強度較小,，有機溶劑可能導致聚合物溶脹而受損，批次重復性較差,，商品化色譜柱不多,，一般價格較貴。
載碳量：基質(zhì)表面鍵合相的比例,，載碳量高,，則保留增加，適合分析非極性化合物,。
鍵合相：鍵合試劑不同,，對化合物的選擇性不同，一般長鏈的烷基鍵合相(C18 ,、C8)比短鏈的(C4,、 C3)穩(wěn)定；非極性的鍵合相比極性的鍵合相(-NH2)穩(wěn)定,。
封端：用短鏈將裸露的硅羥基鍵合后封閉起來,，以減少殘留的硅醇基,，減輕待測組分與酸性硅羥基反應而引起的色譜峰拖尾現(xiàn)象。尤其對于極性樣品而言,，未封端處理的色譜柱分離效果較差,。
原則三：看正相、反相色譜
| 固定相極性 | 流動相極性 | 出峰順序 | |
| 反相吸附色譜 | 非極性 | 強極性（水,、甲醇,、乙腈等） | 強極性物質(zhì)先出峰 |
| 正相吸附色譜 | 極性 | 弱極性（己烷、庚烷等） | 弱極性物質(zhì)先出峰 |
原則四：根據(jù)柱長及內(nèi)徑選擇
長度的選擇：柱越長,，總柱效越高(n值越大),，柱越長，分析時間也越長,。250—300mm是普遍的柱長,，實驗室一半以上的工作都是采用此規(guī)格柱子，一般用來分離l0到50個組份的中等至復雜混合物;500—600mm,，要求較高分辨率的應用,，—般用來分離大于50個組份或包含有難分離物質(zhì)的復雜樣品程序升溫分析。
內(nèi)徑：柱效率與柱半徑平方成反比,，內(nèi)徑越小柱效越高,，但內(nèi)徑越大，柱容量也增加,，允許進樣量就越多,。當進樣量超過柱容量時，則因柱內(nèi)每塊理論板內(nèi)不能建立真正的平衡,，將會導致色譜蜂畸變,，柱分辨率降低，重現(xiàn)性不好,。因此對于復雜樣品需要精確分離,，必須使用小內(nèi)徑柱子。另一方面若樣品中存在具有很不相同濃度組份化合物,，為了增加樣品容量就必須使用內(nèi)徑大的柱子,，目前實驗室使用最常見的柱子內(nèi)徑一般是4.6mm。
一般選擇原則：分析大分子量化合物選擇大孔徑色譜柱,；對于高pH值或者堿性化合物需要選擇高封端或者特殊封端的色譜柱,，以改善峰形，延長色譜柱使用壽命等,。
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