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希伯來(lái)大學(xué)-3D水凝膠單細(xì)胞培養(yǎng)研究
這是微納立方第32篇微流控推文。
Bavli等人基于液滴微流控技術(shù),，研發(fā)了一種名為“CloneSeq”的高靈敏單細(xì)胞分析平臺(tái),，可用于3D細(xì)胞培養(yǎng)的全面表征，揭示了新的癌癥特異性亞群的存在,，并于2021年在Dev. Cell期刊發(fā)表論文（影響引子12.861,，論文鏈接見文末）。
（科學(xué)家和他們的微流控實(shí)驗(yàn)平臺(tái)：為了實(shí)現(xiàn)穩(wěn)定又精確的微流體控制,，獲取誤差最小的數(shù)據(jù),，他們采購(gòu)了幾十個(gè)法國(guó)Fluigent的壓力泵、流量計(jì)和旋轉(zhuǎn)閥等部件,，搭建了一套通用型微流控綜合實(shí)驗(yàn)平臺(tái)）
Bavli等人的實(shí)驗(yàn)大致可分為兩步：
第1步,，在3D水凝膠中完成單細(xì)胞的封裝，并進(jìn)行克隆擴(kuò)增,，流速范圍為8至34μL/min,，每秒生成700個(gè)水凝膠微球。
（水凝膠單細(xì)胞封裝方案示意圖）
（單細(xì)胞封裝與克隆示意圖）
第2步,，進(jìn)行克隆分析,，作者設(shè)計(jì)了另一種微流體方案來(lái)捕獲微滴中的克隆，并使用InDrops protocol對(duì)其進(jìn)行條碼化,。
（InDrops protocol的微流體方案）
（捕捉到的圖像：Single Clone和Barcode Bead被封裝于同一微滴）
實(shí)驗(yàn)完成后,，作者使用Fluigent十轉(zhuǎn)一閥門M-Switch清洗方案，自動(dòng)完成實(shí)驗(yàn)儀器和管路的清洗,。
論文：Bavli, D. et al. CloneSeq: A highly sensitive analysis platform for the characterization of 3D-cultured single-cell-derived clones. Dev. Cell (2021).
DOI: 10.1016/j.devcel.2021.04.026
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