色譜法是一種分離方法,,是利用不同物質(zhì)在不同相態(tài)的選擇性分配,,以流動相對固定相中的混合物進行洗脫,,混合物中不同的物質(zhì)會以不同的速度沿固定相移動,,最終達到分離的效果,。
色譜法根據(jù)物質(zhì)的分離機制可分為離子交換色譜法,、吸附色譜法,、分配色譜法,、凝膠色譜法,、親和色譜法等;根據(jù)流動相的不同又可以分為氣相色譜法和液相色譜法,。目前常見的色譜法有氣相色譜法,、高效液相色譜法(HPLC)、薄層色譜法和柱色譜法等,。
柱色譜法是最原始的色譜方法,,被廣泛應(yīng)用于混合物的分離,包括有機合成產(chǎn)物、天然提取物以及生物大分子的分離,。薄層色譜法因其成本低廉操作簡單而應(yīng)用廣泛,,常被用于對樣品的粗測、對有機合成反應(yīng)進程的檢測等,。氣相色譜法和高效液相色譜法是機械化程度很高的色譜方法,,氣相色譜被廣泛應(yīng)用于小分子量復(fù)雜組分物質(zhì)的定量分析。高效液相色譜法是目前應(yīng)用zui廣泛的色譜方法,,幾乎包括定量定性分析的各個領(lǐng)域,。
氣相色譜系統(tǒng)由氣源、色譜柱和柱箱,、檢測器和記錄器等部分組成,。氣相色譜的色譜柱比較細(xì)長,根據(jù)結(jié)構(gòu)可以分為填充柱和毛細(xì)管柱,,填充柱比較短粗,,外殼材質(zhì)一般為不銹鋼,內(nèi)部填充固定相填料,;毛細(xì)管柱一般由玻璃或石英組成,,內(nèi)徑不超過0.5 mm,長度在數(shù)十米到一百米之間,,柱內(nèi)填充填料,。
高效液相色譜系統(tǒng)由流動相儲液體瓶、輸液泵,、進樣器,、色譜柱、檢測器和記錄器組成,。由于液體流動相粘度比較高,,為了減低柱壓,高效液相色譜的色譜柱一般比較粗,,長度也比氣相色譜柱要短,。
氣相和高效液相色譜系統(tǒng)中的色譜柱內(nèi)部可填充填料,純化分離不同的物質(zhì)需要選擇不同的填料/介質(zhì),。
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