銀杏內酯化合物屬于萜類化合物,,由倍半萜內酯和二萜內酯組成,,是銀杏葉中一類重要的活性成分,。銀杏內酯對血小板活化因子(PAF)受體有強大的特異性抑制作用,,PAF是血小板和多種炎癥組織分泌產生的一種內源性磷脂,是迄今發(fā)現的有效的血小板聚集誘導劑,,它與許多疾病的產生,、發(fā)展密切相關。而銀杏內酯目前認為是最有臨床應用前景的天然PAF受體拮抗劑,,其拮抗作用活性與化學結構密切相關。
對于銀杏內酯的分析,,因其紫外吸收弱,,多采用HPLC-ELSD方法。中國藥典2010版分析銀杏內酯采用正丙醇-四氫呋喃-水,,反相色譜分析,,所使用溶劑為非常規(guī)溶劑,且正丙醇的沸點接近100℃,,在檢測器上揮發(fā)性不好,,容易導致噪音增加,,導致方法重復性差。另外,,由于ELSD靈敏度較低,,使用的對照品量較大。而電霧式檢測器(CAD)是一種通用型檢測器,,具有寬的動態(tài)范圍和低至ng級的檢測靈敏度,,它的檢測不依賴于分析物光學性質,也不依賴于分析物在氣相中離子化的能力,,能夠檢測所有非揮發(fā)性的物質,,同時適用于各種分離模式,如等度,、梯度,,HILIC,離子交換,,SFC和SEC等,。
本方法采用HPLC-CAD方法,采用常規(guī)反相色譜溶劑,,并且使用靈敏度更高的CAD檢測器,,改善了藥典方法的上述缺點。分析柱:Acclaim 120 C18,,5 µm,,150×4.6mm, P/N:059148,;柱溫:35℃,;檢測方式:電霧式檢測器(CAD)Corona Ultra,霧化溫度 35 ℃,,采集頻率10Hz,;進樣量:1 µL;流動相條件:甲醇-水,,梯度洗脫,,流動相條件見表2-27;標準品測定譜圖見圖2-40,。
在靈敏度方面,,相同濃度標準進樣相同體積,在CAD檢測器和ELSD檢測器上比較各峰的靈敏度(表2-28),。結果顯示,,CAD檢測的靈敏度也比ELSD高2倍以上。因此,對于銀杏內酯檢測,,CAD檢測器可以獲得比ELSD更好的靈敏度,。銀杏葉片制劑分析結果見圖2-41。本實驗充分表明電霧式檢測器具有寬的動態(tài)響應范圍和較高的靈敏度,,較ELSD具有更好的穩(wěn)定性,,是測定無紫外吸收物質的選擇。
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