選擇用于完整蛋白質(zhì)分析的反相色譜柱時(shí)需要考慮多個(gè)相互關(guān)聯(lián)的因素：樣品分子量和最適合的填料孔徑，色譜柱固定相,，所用的儀器（特別是檢測器的類型）,，流動(dòng)相條件，以及速度或通量要求等,。

分析物分子越大,，則需要越大的孔徑。除一些例外情況,，用于完整蛋白質(zhì)分析的孔徑通常為 300–500 ?,。根據(jù)經(jīng)驗(yàn),，孔徑至少應(yīng)為蛋白質(zhì)流體動(dòng)力學(xué)半徑的三倍。AdvanceBio RP-mAb 色譜柱具有 450 ? 的孔徑,，ZORBAX RRHD 300 ?,、ZORBAX 300SB 和 Poroshell 300 均具有 300 ? 的孔徑，而 PLRP-S 提供多種孔徑,。雖然 1000 ? 的 5 µm PLRP-S 色譜柱孔徑明顯大于常用于完整蛋白質(zhì)分析的色譜柱,，但是該色譜柱可為完整蛋白質(zhì)和蛋白質(zhì)片段分析提供優(yōu)異的結(jié)果。

對于反相色譜柱,，選擇色譜柱固定相的通用指南是,，分子量越大，使用的烷基鏈應(yīng)越短,。因此,，C18 色譜柱常用于多肽分析，而 C8,、C4 和 C3 色譜柱常用于完整蛋白質(zhì)分離,。除線性烷基鏈以外，AdvanceBio RP-mAb,、ZORBAX RRHD 300 和 ZORBAX 300SB 色譜柱可提供二苯基固定相,。有時(shí)，二苯基固定相的不同選擇性可提供所需的分離,。PLRP-S 是一種聚合物填料而不是硅膠基填料,。它提供典型的反相分離以及略有不同的選擇性和寬 pH 耐受性。

此外,，本篇應(yīng)用文集中還包含 AdvanceBio RP mAb,、PLRP-S、AdvanceBio HIC,、ZORBAX RRHD 300SB 等應(yīng)用簡報(bào)供您查閱,，為生物治療藥物關(guān)鍵質(zhì)量屬性提供新方法，新思路,。