多糖涂敷型手性柱（反相流動(dòng)相）沖洗方法

來源：廣州綠百草科學(xué)儀器有限公司 2022年11月11日 14:46

當(dāng)手性色譜柱分離度下降,、

柱壓過高等色譜柱異常現(xiàn)象發(fā)生時(shí)，

才需要使用本方法沖洗

以下沖洗步驟及流動(dòng)相體系僅適用于大賽璐多糖涂敷型反相手性柱AD-RH/AD-3R,，AS-RH/AS-3R，AY-RH/AY-3R,，AZ-RH/AZ-3R,，OD-R/OD-RH/OD-3R，OJ-RH/OJ-3R,，OX-RH/OX-3R,，OZ-RH/OZ-3R，流速僅適用于3/5/10µm, 4.6*150/250mm規(guī)格,，對(duì)于其他規(guī)格的手性柱,，其沖洗時(shí)所用的流速請(qǐng)根據(jù)各自所能耐受柱壓不同另行調(diào)整。

1,、一般情況下,，使用常規(guī)方法沖洗色譜柱；若常規(guī)方法無效,，則使用特殊方法一沖洗色譜柱,；若特殊方法一無效，則使用特殊方法二沖洗色譜柱,。

2,、沖洗過程中，10µm柱柱壓請(qǐng)勿超過3Mpa,，5µm柱柱壓請(qǐng)勿超過6Mpa,，3µm柱柱壓請(qǐng)勿超過15Mpa。

3,、以下沖洗過程中涉及的流速僅供參考,，實(shí)際操作中以柱壓不超過以上說明為宜。

4,、以下沖洗過程中提到的20倍柱體積,，以4.6*150mm規(guī)格柱為例，約為30mL,。

沖洗方法

常規(guī)方法：

1,、用水/甲醇或水/乙腈(80/20,v/v或85/15,v/v)，流速0.5ml/min,，沖洗20倍柱體積,；

2、沖洗結(jié)束,，驗(yàn)柱或重復(fù)以前的樣品實(shí)驗(yàn),，看是否柱效有提高。

特殊方法一：

1、用水/甲醇(90/10,v/v),，流速0.5 ml/min,，沖洗20倍柱體積；

2,、逐漸提高甲醇的比例到100%,，然后以甲醇100%，0.3ml/min左右的流速,，沖洗20倍柱體積,；

3、逐漸增加水的比例至90%,，即水/甲醇(90/10,v/v),；

4、沖洗結(jié)束,，驗(yàn)柱或重復(fù)以前的樣品實(shí)驗(yàn),，看是否柱效有提高。

特殊方法二：

1,、用水/甲醇(90/10,v/v),，流速0.5 ml/min，沖洗20倍柱體積,；

2,、逐漸提高甲醇的比例到100%，然后以甲醇100%,，0.3ml/min左右的流速,，沖洗20倍柱體積；

3,、再用酸性流動(dòng)相,，甲醇/三氟·乙酸(100/0.1,v/v)，0.3ml/min的流速,，沖洗20倍柱體積,；

4、再用中性流動(dòng)相甲醇過渡,，甲醇100%,，0.3ml/min的流速，沖洗20倍柱體積,；

5,、逐漸增加水的比例到90%，即水/甲醇(90/10,v/v),；

6,、沖洗結(jié)束,，驗(yàn)柱或重復(fù)之前的樣品實(shí)驗(yàn)，看是否有提高柱效,。

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