當(dāng)手性色譜柱分離度下降,、
柱壓過(guò)高等色譜柱異?,F(xiàn)象發(fā)生時(shí),
才需要使用本方法沖洗
1,、一般情況下,,使用常規(guī)方法沖洗色譜柱;若常規(guī)方法無(wú)效,,則使用特殊方法一沖洗色譜柱,;若特殊方法一無(wú)效,則使用特殊方法二沖洗色譜柱,。
2,、沖洗過(guò)程中,10µm柱柱壓請(qǐng)勿超過(guò)3Mpa,,5µm柱柱壓請(qǐng)勿超過(guò)6Mpa,,3µm柱柱壓請(qǐng)勿超過(guò)15Mpa。
3,、以下沖洗過(guò)程中涉及的流速僅供參考,,實(shí)際操作中以柱壓不超過(guò)以上說(shuō)明為宜。
4,、以下沖洗過(guò)程中提到的20倍柱體積,,以4.6*150mm規(guī)格柱為例,約為30mL,。



常規(guī)方法:
1,、用水/甲醇或水/乙腈(80/20,v/v或85/15,v/v),流速0.5ml/min,,沖洗20倍柱體積,;
2,、沖洗結(jié)束,驗(yàn)柱或重復(fù)以前的樣品實(shí)驗(yàn),,看是否柱效有提高,。
特殊方法一:
1,、 用水/甲醇(90/10,v/v),,流速0.5 ml/min,,沖洗20倍柱體積,;
2,、逐漸提高甲醇的比例到100%,,然后以甲醇100%,,0.3ml/min左右的流速,,沖洗20倍柱體積,;
3,、逐漸增加水的比例至90%,即水/甲醇(90/10,v/v),;
4,、沖洗結(jié)束,驗(yàn)柱或重復(fù)以前的樣品實(shí)驗(yàn),,看是否柱效有提高,。
特殊方法二:
1、用水/甲醇(90/10,v/v),,流速0.5 ml/min,,沖洗20倍柱體積;
2,、逐漸提高甲醇的比例到100%,,然后以甲醇100%,0.3ml/min左右的流速,,沖洗20倍柱體積,;
3、再用酸性流動(dòng)相,,甲醇/三氟·乙酸(100/0.1,v/v),,0.3ml/min的流速,沖洗20倍柱體積,;
4,、再用中性流動(dòng)相甲醇過(guò)渡,甲醇100%,,0.3ml/min的流速,,沖洗20倍柱體積;
5、逐漸增加水的比例到90%,,即水/甲醇(90/10,v/v),;
6、沖洗結(jié)束,,驗(yàn)柱或重復(fù)之前的樣品實(shí)驗(yàn),,看是否有提高柱效。
相關(guān)產(chǎn)品
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