水是細胞賴以生存的主要環(huán)境,，營養(yǎng)物質(zhì)和代謝產(chǎn)物都必須溶解在水中,，才能為細胞吸收和排泄,。對于體外培養(yǎng)的細胞來說,，水是所有細胞培養(yǎng)用液和試劑中較簡單,、但也是最重要的組分。細胞培養(yǎng)對水的質(zhì)量要求較高,，培養(yǎng)用水中如果含有一些雜質(zhì),，即使含量極微，有時候也會影響細胞的存活和生長,，甚至導(dǎo)致細胞死亡,。



水中的雜質(zhì)對水質(zhì)有不同影響：

• 離子，平衡滲透壓；

• 微生物,，污染,，改變微壞境如pH，影響增殖,，死后釋放內(nèi)毒素等,；

• 內(nèi)毒素，改變細胞外形,、活化細胞,、促進或抑制細胞分裂、影響細胞附著等,；

• 有機物,，水中有機物所含碳的總量可間接反映出水中細菌和內(nèi)毒素的含量，應(yīng)控制在合理范圍內(nèi),，以免影響細胞培養(yǎng),。

水質(zhì)評價常用的指標(biāo)：

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• 電阻率（electrical resistivity），衡量實驗室用水導(dǎo)電性能的指標(biāo),，單位為MΩ·cm,，隨著水內(nèi)無機離子的減少電阻數(shù)值逐漸變大；

• 異體菌落數(shù)（heterotrophic bacteriacount,，HBC）,，衡量實驗室用水微生物的指標(biāo)，單位為cfu/ml

• 有機物（total organic carbon,，TOC）,，水中碳的濃度，反映水中可氧化的有機化合物的含量,，單位為μg/L或ppd,；

• 內(nèi)毒素（endotoxin），革蘭氏陰性菌的脂多糖細胞壁碎片,，又稱為“熱原”,，單位EU/ml。

參考國際標(biāo)準(zhǔn)化組織的實驗室純水規(guī)范ISo3696,，美國臨床試驗室標(biāo)準(zhǔn)化協(xié)會（Clinical and Laboratory Standards Institute）及美國試驗和材料學(xué)會（American Society for Testing and Materials）D1193的試劑純水規(guī)范,，我國GBT6682和GBT30301的實驗用水指導(dǎo),，結(jié)合實際的實驗操作經(jīng)驗,。總結(jié)細胞培養(yǎng)的水質(zhì)要求 ：

• 一定要無菌,，HBC＜0.1cfu/ml,；

• 無蛋白及核酸酶和內(nèi)黑素；

• 無內(nèi)毒素或無熱源，＜0.001EU/ml,；

• TOC＜3ppd,，一些重金屬（鎘）毒害大，即便是很低劑量（＜0.1ppd）也有影響,；

• 電阻率≥18MΩ.cm

細胞培養(yǎng)以及各種培養(yǎng)液和試劑的配置用水均需要經(jīng)過嚴(yán)格的純化處理,；即使是玻璃器皿，在用自來水清洗過后也應(yīng)至少用超純水漂洗三次以上,。
目前,，市場上供應(yīng)的純水裝置種類較多， 比如自來水進水同時制備二級純水和超純水的一體化純水裝置,，可以由自來水進水通過預(yù)處理柱,、反滲透柱及電去離子（EDI）模塊等純化后達到二級純化水，儲存于水箱中以滿足日常的清洗,；水箱中的水再經(jīng)過超純化柱去離子,，紫外燈照射殺菌和降低有機物，最后經(jīng)終端除內(nèi)毒素濾器達到無菌無熱源的超純水,。




純水的儲存對保持水的質(zhì)量也是至關(guān)重要的,，由于周圍環(huán)境和空氣中的二氧化碳更容易使水污染改變其pH，所以儲存水的容器要盡量密封,，避免和外界過多接觸,，抑制微生物生長。EVOQUA的Ultra Clear系列超純水機水箱中內(nèi)置紫外燈和二氧化碳吸附濾器長期保證水箱中純水的水質(zhì),。

對于超純水而言尤其需要格外注意終端水質(zhì)的TOC,、電阻率、細菌和內(nèi)毒素的含量,，必須做到即取即用,。因此取水水質(zhì)實時監(jiān)測顯得尤為重要。EVOQUA的Ultra Clear系列超純水機擁有7" 彩色觸摸顯示屏,，可以顯示各階段水質(zhì)等重要參數(shù)和耗材更換倒計時,，操作簡單直觀。UV燈,、TOC監(jiān)測和UF超濾模塊保證了優(yōu)秀的水質(zhì),。這些裝置可有效去除 RNase、DNase 和DNA 等污染物,。并可使內(nèi)毒素水平低于 0.001EU/ml,。


EVOQUA 懿華，Ultra Clear TP ED 20 TWF EDI 30 UV UF TM 超純水機


【注意事項】

1. 超純水應(yīng)當(dāng)注意使用時間,，最好即取即用,。防止超純水吸取外界的雜質(zhì)導(dǎo)致水質(zhì)下降,。

2. 在合適的環(huán)境使用超純水。環(huán)境中的揮發(fā)性有機物,、細菌等都會影響細胞培養(yǎng),。

3. 培養(yǎng)細胞的容器應(yīng)當(dāng)潔凈無污染。