江蘇恒敏儀器冷凍干燥機主要部件分為干燥箱、凝結(jié)器,、冷凍機組,、真空泵、加熱/冷卻裝置等,。凍干機起源于19世紀20年代的真空冷凍干燥技術(shù),，后真空凍干技術(shù)除了在醫(yī)藥上有著廣泛應(yīng)用，在生物制品,、食品,、血液制品、活性物質(zhì)領(lǐng)域之外的領(lǐng)域也發(fā)揮了重要作用,。下面小編為大家介紹下微生物菌種的冷凍干燥保藏操作流程：
 凍干機適用于大多數(shù)細菌,、放線菌、病毒,、噬菌體,、立克次體、霉菌和酵母等的真空冷凍干燥保藏,，但不適于霉菌的菌絲型,、菇類、藻類和原蟲等,。其操作流程如下：
 1,、安瓿管準備
 安瓿管材料以中性玻璃為宜。清洗安瓿管時,，先用2%鹽酸浸泡過夜,，自來水沖洗干凈后，用蒸餾水浸泡至pH中性,，干燥后,、貼上標簽，標上菌號及時間,，加入脫脂棉塞后,，121℃下高壓滅菌15-20分鐘，備用,。
 2,、保護劑的選擇和準備
 保護劑種類要根據(jù)微生物類別選擇。配制保護劑時,，應(yīng)注意其濃度及pH值,，以及滅菌方法,。如血清，可用過濾滅菌,；牛奶要先脫脂,，用離心方法去除上層油脂，一般在100℃間歇煮沸2-3次,，每次10-30分鐘,，備用。
 3,、凍干樣品的準備
 在適宜的培養(yǎng)條件下將細胞培養(yǎng)至靜止期或成熟期,，進行純度檢查后(參見科技部自然科技資源平臺聯(lián)合管理辦公室文件《微生物菌種純度檢測技術(shù)規(guī)程》(試行))，與保護劑混合均勻,，分裝,。微生物培養(yǎng)物濃度以細胞或孢子不少于108-1010個/ml為宜(以大腸桿菌為例，為了取得每毫升1010個活細胞菌液2毫升-2.5毫升,，只需10毫升瓊脂斜面兩支),。采用較長的毛細滴管，直接滴入安瓿管底部,，注意不要濺污上部管壁,，每管分裝量約0.1-0.2毫升，若是球形安瓿管,，裝量為半個球部,。若是液體培養(yǎng)的微生物，應(yīng)離心去除培養(yǎng)基,，然后將培養(yǎng)物與保護劑混勻,，再分裝于安瓿管中。分裝安瓿管時間盡量要短,，在1-2小時內(nèi)分裝完畢并預(yù)凍,。分裝時應(yīng)注意在無菌條件下操作。
 4,、預(yù)凍
 一般預(yù)凍2小時以上,，溫度達到-20℃到-35℃左右。
 5,、冷凍干燥
 采用凍干機進行冷凍干燥,。將冷凍后的樣品安瓿管置于冷凍干燥機的干燥箱內(nèi)，開始冷凍干燥,，時間一般為8-20小時,。
 終止干燥時間應(yīng)根據(jù)下列情況判斷：
 安瓿管內(nèi)凍干物呈酥塊狀或松散片狀；
 真空度接近空載時的最高值；
 樣品溫度與管外溫度接近,；
 選用1-2支對照管,，其水份與菌懸液同量，視為干燥完結(jié),；
 選用一個安瓿管，裝1-2%氯化鈷,，如變深蘭色,，可視為干燥完結(jié)；
 冷凍干燥完畢后,，取出樣品安瓿管置于干燥器內(nèi),，備用。
 6,、真空封口及真空檢驗
 將安瓿管頸部用強火焰拉細,，然后采用真空泵抽真空，在真空條件下將安瓿管頸部加熱熔封,。熔封后的干燥管可采用高頻電火花真空測定儀測定真空度,。
 7、保藏
 安瓿管應(yīng)低溫避光保藏,。
 8,、質(zhì)量檢查
 冷凍干燥后抽取若干支安瓿管進行各項指標檢查，如存活率,、生產(chǎn)能力,、形態(tài)變異、雜菌污染等,。