高效液相色譜儀由儲液器、泵,、進樣器,、色譜柱,、檢測器,、記錄儀等幾部分組成。高效液相色譜儀(HPLC)是應(yīng)用高效液相色譜原理,,主要用于分析高沸點不易揮發(fā)的,、受熱不穩(wěn)定的和分子量大的有機化合物的儀器設(shè)備。
對樣品的要求:
1,、要求樣品能溶于水,、乙腈、甲醇,、乙醇,,能夠在C18反相柱上保留,如使用其他色譜柱需自備,;
2,、需要提供測試組分的紫外吸收波長;
3,、溶液樣品至少0.5ml,,溶液須過濾膜,無不溶性顆粒;
4,、定量需要提供標準品,。
高效液相色譜儀的使用方法:
1、開機設(shè)定參數(shù)(檢測波長,、流速),,更換所需流動相,檢查色譜柱是否正確,。
2,、排液置換管路中流動相,沖洗進樣閥,,洗好進樣針,。
3、沖洗色譜柱進行平衡,,其間可提前進行樣品的處理,,樣品信息的注冊。
4,、平衡好以后進空白試驗,,排除系統(tǒng)污染。
5,、柱子穩(wěn)定好以后進樣,,等待運行結(jié)束(其間清洗進樣針),積分計算,,出具報告,。
注意事項:
1、流動相均需色譜純度,,水用20M的去離子水,。脫氣后的流動相要小心振動盡量不引起氣泡。
2,、柱子是非常脆弱的,,第一次做的方法,先不要讓液體過柱子,。
3,、所有過柱子的液體均需嚴格的過濾。
4,、壓力不能太大,,盡量不要超過2000 psi。
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