持續(xù)的疫情給實驗室?guī)砹藟毫Γ蛊洳坏貌惶嵘ぷ鞯闹悄芑?，提高效率,，以確保盡可能地減少疫情對現(xiàn)有檢測體系的影響。因此,，位于美國康科德,，隸屬于新罕爾州公共衛(wèi)生實驗室的蟲媒病毒檢測實驗室采用了自動化的樣本混合流程來進(jìn)行西尼羅病毒 (WNV) 和東部馬腦炎 (EEE) 病毒的檢測。

蟲媒病毒,，專指所有通過節(jié)肢動物攜帶者（如蚊子和扁虱）傳播的病毒,，其中就包括西尼羅病毒和東部馬腦炎病毒，兩者均能經(jīng)由感染蚊子的叮咬感染人類,。一些監(jiān)測項目能夠為如何應(yīng)對這些蚊媒傳染病提供有價值的數(shù)據(jù),，公共衛(wèi)生實驗室的蟲媒病毒檢測實驗室所運營的項目就是其中之一。

與各地的很多實驗室一樣,，疫情迫使蟲媒病毒檢測實驗室對其蚊子監(jiān)測項目進(jìn)行了巨大的改變,，采用了借助 ASSIST PLUS 移液工作站的自動化混合樣本檢測工作流程。實驗室主管Denise Bolton解釋說：“我們意識到,，對于檢測物資的需求激增,、有限的PCR儀器產(chǎn)能以及實驗室工作人員的巨大壓力還將持續(xù)一段時間。早在疫情之前,，我們就一直在考慮嘗試一種用于蟲媒病毒監(jiān)測的混合檢測模型,，而現(xiàn)在，我們認(rèn)為是時候該實施這種方法了,。"

轉(zhuǎn)向混合檢測

在研究了混合檢測方法并為實驗室設(shè)計了方案后,，他們通過檢測不同濃度的WNV/EEE陽性樣本組合進(jìn)行了“概念驗證"。實驗證明,，在由4份試樣組成的混合樣本中,，即使是非常低濃度的陽性樣本也能被檢出?！膀炞C實驗顯示了很高的準(zhǔn)確度和靈敏度,，我們在2020年夏天應(yīng)用了混合樣品檢測流程，初采用手動進(jìn)行樣品混合,。蚊子的處理是一項非常繁重的工作,，很多步驟都需要打開和蓋上試管以及移取樣品,，并且所有步驟都必須嚴(yán)格遵循安全流程來執(zhí)行。額外的樣品混合步驟讓整個步驟更加繁瑣了,，需要占用實驗員超過一小時,，且需要高度的集中和專注。從質(zhì)控的角度來看,，在處理過程之后增加一個手動的混合步驟也是很有風(fēng)險的,，我擔(dān)心實驗員可能會出錯。"

降低出錯概率

為了盡可能地降低出現(xiàn)手動處理錯誤的可能性,，該實驗室決定在一臺ASSIST PLUS移液工作站上將樣品混合過程自動化,。“我很熟悉ASSIST PLUS,，因為我們用它來處理我們的樣品,，"Denise說?！半S儀器提供的VIALAB軟件讓編寫混合程序變得非常輕松,，而INTEGRA移液器的靈活性意味著我們無需改變我們的蚊子處理方法。我們使用ASSIST PLUS配合一臺8通道的VOYAGER可調(diào)槍頭間距移液器來將試樣從2 ml試管中轉(zhuǎn)移到96孔板中,，以構(gòu)建包含4份樣本的200 µl混合樣本,。該過程完成后，ASSIST PLUS會直接將裂解緩沖液加入混合樣本,，隨后整個混合樣本將被用于核酸提取,。這簡化了處理過程，節(jié)省了時間并且減少了塑料實驗室器具的使用,，因為我們不再構(gòu)建大體積的混合樣本然后移取等分來進(jìn)行提取了,。如此應(yīng)用ASSIST PLUS讓我們得以將2個此前需要手動執(zhí)行的步驟自動化，實現(xiàn)了2個移液步驟的自動化,，實際上減少了對用戶輸入的需求,。"

節(jié)省時間和經(jīng)費

對蟲媒病毒監(jiān)測采用了混合檢測后，提取和PCR試劑節(jié)省了75%,，監(jiān)測項目對PCR儀器的使用也減少了,。“使用ASSIST PLUS移液工作站進(jìn)行樣本混合節(jié)省了實驗員的寶貴時間,，更重要的是,，它讓我們確信整個過程中復(fù)雜的步驟正在無誤地執(zhí)行，"Denise 總結(jié)道,。

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