如何選擇適合應(yīng)用需要的過濾器
根據(jù)應(yīng)用需要,,選擇適合的過濾器,,需要重點考慮如下4個因素:
1.是否要求過濾器兼容自動化裝置,?
2.過濾器的化學(xué)相容性如何,?
a.濾膜對于接觸流體的耐受能力
b.可萃取物
C.吸附性
3.過濾中需要多大的有效過濾面積?
4.樣品純化所需的最jia孔徑額定值為何,?
1.通過自動化認(rèn)證非常重要
如果準(zhǔn)備將過濾器用于自動化工作站中,,譬如Caliper Life Sciences公司的BenchMate*、Prelude*,、TPWII或Multi-Dose*裝置中,, 選擇過濾器必須性能可靠,并能在樣品自動處理裝置中連續(xù)運行,。
●Pall Life Sciences出品的Acrodisc PSF針頭式過濾器,,是唯yi獲得Caliper Life Sciences公司自動化認(rèn)證證書的針頭式過濾器。對于符合自動化分配,、處理,、裝配嚴(yán)格要求的針頭式過濾器,才能頒發(fā)此認(rèn)證證書,。Pall公司持有此認(rèn)證證書的過濾器,,可用于BenchMate、Prelude,、
TPWII以及Multi-Dose工作站中.
●Acrodisc PSF針頭式過濾器經(jīng)過特別設(shè)計,,可滿足自動化系統(tǒng)中的苛刻要求。實踐證明此過濾器擁有:過濾器-過濾器之間平穩(wěn)釋放,、連貫的轉(zhuǎn)動架前行,、出眾的濾殼強度、精密的外部幾何形狀,,從而確保正確對齊與穩(wěn)定的運行,。
2.考慮化學(xué)相容性
過濾器是否需要具備對于酸、堿或有機溶劑的耐受能力,?根據(jù)應(yīng)用選擇樣品制備針頭式過濾器或流動相濾片過濾器時,,必須著重考慮其化學(xué)相容性。以下寬泛的選擇原則,僅用于基本參考,,請參閱化學(xué)相容性圖表,,以確定適合具體應(yīng)用的過濾器類型。
水相樣品
過濾水相樣品時,,親水性濾膜由于其水親和性而備受青睞,,可利用配備GHP (親水性聚丙烯)、PES (聚醚砜),、尼龍或PVDF (聚偏氟乙烯)濾膜的Pall Life Sciences過濾器,。
氣體與侵蝕性有機溶劑
疏水性濾膜排斥水分,對侵蝕性有機溶劑具有惰性,,從而成為氣體與有機溶劑處理時的shou選,,可選擇配備PTFE (疏水性聚四氟乙烯)濾膜的Pall Life Sciences過濾器。
含水溶液與有機溶劑溶液
不同聚合體的濾膜有著不同的化學(xué)相容性,?;趹?yīng)用和化學(xué)相容性,可能存在一種或多種濾膜與Acrodisc針頭式過濾器組合的可能性,。通常,,由于疏水性/親水性以及化學(xué)相容性的限制,單一類型的過濾器不可能勝任所有的應(yīng)用,。然而,,作為一種通用濾膜,Pall Life Sciences擁有專li的GHP濾膜可以同時勝任含水溶液與有機溶液的過濾,。
極低的萃取水平
過濾器用于去除不需要的微粒物,,以提高精確度。然而,,選用不恰當(dāng)?shù)倪^濾器,,可能使之成為污染物的來源,可萃取物被從過濾器裝置上洗脫,,并進入樣品,。這些不需要的假象將會危及分析結(jié)果的準(zhǔn)確性,可萃取物造成的一-些問題包括: 共同洗脫,、定量錯誤以及外來峰值,。
Pall Life Sciences專門選用高級別的結(jié)構(gòu)材料,并對濾膜產(chǎn)品進行嚴(yán)格的萃取處理,,以避免出現(xiàn)不需要的假象,。
通過HPLC (高壓液相)低萃取性相關(guān)認(rèn)證
Pall Life Sciences通過HPLC認(rèn)證,確保分析結(jié)果的準(zhǔn)確性不因過濾器材料的可萃取物受到干擾,。對于Acrodisc HPLC針頭式過濾器整個系列的產(chǎn)品,,隨機抽取樣品,,在標(biāo)準(zhǔn)HPLC條件下,以常用HPLC溶劑測試其相容性,,以檢驗是否存在低水平的,、紫外光可檢測到的可萃取物。
通過IC (離子色譜)低水平無機物可萃取物相關(guān)認(rèn)證
Pall Life Sciences保證Acrodisc IC (離子色譜)針頭式過濾器業(yè)已經(jīng)過以下測試:執(zhí)行高度敏感的離子色譜操作過程以監(jiān)測無機可萃取物,。在離子層析應(yīng)用中,,只有Acrodisc IC(離子色譜)針頭式過濾器通過了低無機可萃取物認(rèn)證。通常,,過濾器可萃取物的實際背景水平分別低于20ppb(對于氯化物而言),,6 ppb (對于硝酸鹽而言),1 ppb (對于磷酸鹽而言),,10 ppb (對于硫酸鹽而言),。
樣品吸附
應(yīng)選擇低吸附性的過濾器,譬如配備GHP濾膜的Acrodisc針頭式過濾器: GHP濾膜的生物分子結(jié)合能力非常之低,,典型的結(jié)合水平遠遠低于1%,。
3.選擇最jia的有效過濾面積
流體中包含的微粒影響了過濾器的使用壽命。從流體中去除的微粒會堵塞濾膜微孔,,降低過濾器的可用比例。通常,,對比“清潔”流體,,微粒濃度較高的流體將會更快地堵塞過濾器。提高有效過濾面積能夠延長過濾器的使用壽命,。
過濾器的尺寸多種多樣,,從96孔過濾板上單個微孔中的過濾面積,直至離心過濾器和針頭式過濾器,。Acrodisc針頭式過濾器為25mm Acrodisc PSF針頭式過濾器,,處理較小體積的樣品時,也可選擇直徑為13mm或4mm的針頭式過濾器,。所有過濾器,,均備有多種濾膜和孔徑以供選擇。
選擇過濾器尺寸的另外一個因素是殘留體積,,即過濾器使用完畢后其中的殘存流體體積,。處理成本高昂或異常珍貴的流體時,建議使用低殘留體積的過濾器,。zui大程度地降低殘留體積,,同時確保樣品的*過濾,需要多大的裝置尺寸,? Pall Life Sciences提供多種裝置尺寸以供選擇,。Minispike出口可選配于13mm直徑的濾器中,最小程度地減少殘留樣品,并輕松分配到自動取樣瓶中,。其它選擇包括4mm Acrodisc針頭式過濾器,、Nanosep MF離心過濾器、或AcroPrep TM過濾板,。
選擇針頭式過濾器與離心過濾器
下表粗略描述了:對應(yīng)流體不同體積數(shù),,選擇過濾器相應(yīng)尺寸的一般原則。
考慮進行預(yù)過濾
對于難以過濾的樣品,,最好使用其濾膜上加裝玻璃纖維預(yù)濾膜的針頭式過濾器,。樣品中包含的顆粒如果格外地密集,配備GxF多層玻璃纖維預(yù)濾膜的Acrodisc PSF針頭式過濾器將是最jia選擇,。Pall公司傳統(tǒng)的,、配備GHP濾膜和尼龍濾膜的Acrodisc針頭式過濾器,均提供加裝單層玻璃纖維預(yù)濾膜型號,。
Acrodisc PSF針頭式過濾器使用連續(xù)玻璃纖維(GxF) 預(yù)濾膜,,這種預(yù)濾器能使通過量達到最大,并且能夠比標(biāo)準(zhǔn)的玻璃纖維預(yù)濾膜獲得更高的流速,。多層預(yù)濾器的空孔從0.40以上到1μm,,有效捕獲顆粒并延長過濾器的使用壽命。
輕松識別
所有Acrodisc針頭式過濾器及其包裝均印制編碼色彩,,標(biāo)明每個過濾器的濾膜類型和孔徑:
● GHP (親水性聚丙烯) ●尼龍
● PTFE (疏水性聚四氟乙烯) ●玻璃纖維
● PVDF (聚偏氟乙烯) ●PES (聚醚砜)
選擇多微孔過濾板
隨著樣品越來越細微,,處理量越來越大,需要更新的高通量樣品制備方法,,為應(yīng)對此要求,,Pall Life Sciences開發(fā)了全新的過濾裝置,以簡化和促進樣品制備進程,。
下表粗略描述了:對應(yīng)流體不同體積數(shù),,選擇過濾器相應(yīng)尺寸的一般原則。
利用AcroPrep 96孔過濾板進行樣品制備
在分析或分子生物學(xué)應(yīng)用中,,AcroPrep 96孔過濾板的樣品提純性能非常優(yōu)秀,,過濾器底板的最常見問題得到緩解,這都應(yīng)當(dāng)歸功于此過濾板如下特殊性質(zhì):
●其設(shè)計符合ANSI/SBS X-2004標(biāo)準(zhǔn),。 設(shè)計兼容自動化處理裝置,,剛性的一體成形結(jié)構(gòu),使得自動化系統(tǒng)能夠順利處理過濾板,,并確保過濾板能夠順利通過探測器
●聚丙烯過濾板組件能夠耐受化學(xué)藥品,,生物分子結(jié)合能力低
●序列化條形碼標(biāo)簽,便于自動化系統(tǒng)跟蹤及識別濾膜類型
●針對不同應(yīng)用,,可選擇多種膜材
利用AcroPrep 24孔過濾板進行樣品制備
利用針頭式過濾器進行處理,,非常耗時,,而且每次只能處理一個樣品,而利用AcroPrep 24孔過濾系統(tǒng),,可同時進行多達24個樣品的過濾處理,。此過濾系統(tǒng)包含一個真空裝置,以安
置Waters公司Alliance 2690樣品瓶圓盤吊籃裝置,,以及包含24孔濾膜過濾器的一次性AcroPrep過濾板,。如果要求進行預(yù)洗處理,真空裝置的標(biāo)準(zhǔn)配置中將可選包括預(yù)過濾板,。
系統(tǒng)的優(yōu)勢:
●同時對于多達24個樣品進行過濾處理,,從而加快樣品制備進程,減少人工支出
●無需使用獨立包裝的一次性針筒
●對比傳統(tǒng)的針頭式過濾器技術(shù),,此過濾系統(tǒng)擁有較高的性價比,,占用較少的工作臺空間
●通過HPLC (高壓液相)認(rèn)證,確??奢腿〉倪^濾器材料不會干擾分析結(jié)果的準(zhǔn)確性
●各微孔分別獨立封裝,,杜絕交叉污染
●一次性過濾板中可選配多種濾膜,滿是各種應(yīng)用的需求
●其結(jié)構(gòu)材料與Pall Life Sciences Acrodisc PSF針頭式過濾器全線產(chǎn)品的結(jié)構(gòu)材料*相同
4.考慮孔徑大小
假設(shè):希望延長層析柱的使用壽命,,減少污染物混進泵送系統(tǒng)導(dǎo)致的維護頻率,,進而獲得性價bizui高的分析結(jié)果。
以此假設(shè)作為前提,,應(yīng)當(dāng)基于層析柱的填料尺寸確定過濾器的孔徑大小,。如圖2所示,層析柱的填料顆粒彼此相互接觸,。就理論而言,,污染物不應(yīng)嵌人填料之間的空間,,此空間(標(biāo)記的流體通路)在下面的圖2中有所標(biāo)示,。我們旨在查明此空間的大小,以去除同等大小的顆粒物質(zhì),。
譬如:從3μm填料尺寸著手,,劃出幾個定位良好的等邊三角形,如圖3所示,;劃出一個邊長為0.75μm的等邊三角形,,以確定能夠配合層析柱的最大顆粒尺寸。
現(xiàn)在,,將此圖放大,,進一步考察。直觀化顯現(xiàn)一系列邊長降至0.75μm的等邊三角形,。如圖4所示的直角三角形,,其短邊象征著球體半徑,,角度為60°的一半(或30°),此新直角三角形的水平邊長度為0.375μm (0.75μm的一半),。計算30°的正切值,,獲得斜邊的對邊長度比率,就此范例而言,,此正切值為0.58,,這意味著,此直角三角形的短邊長等于0.58 x
0.375μm (或0.217μm) ,,非常巧合,,這也是顆粒物質(zhì)的半徑值。因而,,層析柱填料尺寸的直徑如果是3μm,,流體通路將為0.43μm。
高壓液相層析柱的填料尺寸等于或小于3μm時,,應(yīng)當(dāng)使用0.2μm級過濾器,,如果使用0.45μm級過濾器,將不能有效截留堵塞層析柱的顆粒物質(zhì),。
是否關(guān)注顆粒物質(zhì)的準(zhǔn)確截留,?
在液相層析系統(tǒng)中使用填料尺寸大于3μm的層析柱,對于針頭式過濾器和流動相濾膜而言,,請選擇孔徑為0.45μm的過濾器/膜如果層析柱的填料尺寸等于或小于3μm,、微量層析柱、
或需要關(guān)注微生物生長,,建議使用0.2μm過濾器/膜,。
一旦選定適合特定應(yīng)用的孔徑額定值,過濾器制造商能否提供擁有精確孔徑額定值的過濾器,,就成為關(guān)鍵所在,。在“延長高壓液相層析柱使用壽命”章節(jié)中,闡釋了:對于適當(dāng)過濾器的選擇,,性價比的提高,,孔徑額定值的精確性具有重大意義。
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