液質(zhì)聯(lián)用(HPLC-MS)又叫液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù),，它以液相色譜作為分離系統(tǒng)，質(zhì)譜為檢測系統(tǒng),。樣品在質(zhì)譜部分和流動相分離,，被離子化后，經(jīng)質(zhì)譜的質(zhì)量分析器將離子碎片按質(zhì)量數(shù)分開,，經(jīng)檢測器得到質(zhì)譜圖,。液質(zhì)聯(lián)用體現(xiàn)了色譜和質(zhì)譜優(yōu)勢的互補(bǔ)，將色譜對復(fù)雜樣品的高分離能力,，與MS具有高選擇性,、高靈敏度及能夠提供相對分子質(zhì)量與結(jié)構(gòu)信息的優(yōu)點(diǎn)結(jié)合起來，在藥物分析,、食品分析和環(huán)境分析等許多領(lǐng)域得到了廣泛的應(yīng)用,。

一、質(zhì)譜儀工作環(huán)境要求：①周圍無強(qiáng)烈震蕩源及電磁感應(yīng)裝置;②電源要求接地交流電;③室溫要求15～28℃;④相對濕度要求20%～80%,。

使用過程中要特別注意室內(nèi)溫度和濕度的控制,。一般沒有外置飛行管的飛行時間質(zhì)譜對環(huán)境的要求更嚴(yán)格，外部環(huán)境會直接影響質(zhì)量軸的準(zhǔn)確性,。質(zhì)譜儀采用兩級抽氣結(jié)構(gòu),，前級為機(jī)械泵，后級為分子渦輪泵工作時先由前級泵,，將真空腔內(nèi)的壓強(qiáng)降低幾個數(shù)量級,，再由后級泵降至工作所需壓強(qiáng)。

二,、使用要求：1.開機(jī)：

質(zhì)譜儀的開機(jī)首先開氣,，再開機(jī)械泵，再打開質(zhì)譜儀的電源,，等真空度達(dá)到后再開啟分子渦輪泵,，等真空度達(dá)到后才可以進(jìn)行調(diào)諧校正，一般至少需要抽12個小時才能達(dá)到。每次開機(jī)后都需要校正后才能使用質(zhì)譜儀,。

2,、樣品測試過程：(1)與液相色譜聯(lián)用時，流動相需要先用<0.45μm的膜過濾,，需要區(qū)別有機(jī)膜和水膜,，樣品也同樣需要過濾或者用>10000rpm的轉(zhuǎn)速離心去掉固體雜質(zhì)。(2)流動相不能用難揮發(fā)的酸或鹽,，如磷酸鹽和硼酸鹽,，液相常用的TFA會抑制離子電離，也不建議使用;表面活性劑在質(zhì)譜中響應(yīng)很高,，尤其是ESI源,，所以所有管和器具的清洗不能用洗潔精，用來改善分離和色譜峰形的離子對試劑也應(yīng)慎用,。與質(zhì)譜聯(lián)用時建議使用的是甲酸,、乙酸、甲酸銨,、乙酸銨和氨水等,。(3)根據(jù)選用的離子源調(diào)整液相方法，ESI源一般用0.3~0.6mL/min,，常規(guī)HPLC分析柱的規(guī)格是5μm,，4.6×250mm的，一般流速都是1mL/min,，可以采用柱后分流的方式來調(diào)整進(jìn)入質(zhì)譜的流量,。同時要根據(jù)進(jìn)入質(zhì)譜的流量和樣品性質(zhì)調(diào)整霧化氣溫度和霧化氣的流量。

3,、樣品測試結(jié)束后,，需要清洗進(jìn)樣管路，清洗后停泵,，待離子源溫度降低后再選擇待機(jī)狀態(tài),。

三、液質(zhì)日常定期維護(hù)

1,、使用的穩(wěn)壓電源UPS,，保證儀器電源電壓穩(wěn)定持續(xù)(特別是停電時對儀器的影響)。

2,、每天用異丙醇溶液沖洗系統(tǒng)和清潔霧化室,，定期開震氣閥震氣(對于ESI源，至少每星期做一次;對于APCI源,，每天做一次),，保證毛細(xì)管潔凈。

3,、流動相流速不要過高,，ESI離子源不要超過0.5ml/min，APCI不要超過1.0ml/min,。

4,、機(jī)械泵的泵油需要定期更換，一般半年更換一次,，如果泵油看起來很臟,，需要提前更換。更換泵油的時候需要將泵油全部倒出,，再更換新的泵油,，不同品牌的泵油不能混用。一般實驗室的質(zhì)譜儀都會在長假的時候進(jìn)行大的維護(hù),。

5,、控制好樣品運(yùn)行的環(huán)境，包括溫度和濕度,。

6,、實驗完畢后要清洗進(jìn)樣針、進(jìn)樣閥等,，用過含酸的流動相后,，色譜柱和離子源都要用甲醇/水沖洗。

7,、定期清洗樣品錐孔,，關(guān)閉隔斷閥，取下樣品錐孔,，先用甲醇：水：甲酸(45：45：10)的溶液超聲清洗10分鐘,，然后在分別用超純水和甲醇各溶液超聲清洗10分鐘，待晾干后再安裝到儀器上,。

8,、流動相要現(xiàn)用現(xiàn)配，最好不要過夜,，一定要新鮮,。

9、定期更換電子倍增器,。