手機(jī)版
化工儀器網(wǎng)手機(jī)版
化工儀器網(wǎng)小程序
官方微信
公眾號：chem17
掃碼關(guān)注視頻號
常用的計(jì)數(shù)方法主要有手工計(jì)數(shù)(如利用改良牛鮑計(jì)數(shù)板)和細(xì)胞計(jì)數(shù)儀計(jì)數(shù)(經(jīng)費(fèi)充裕組常備)。從原理來說,，這兩種方法基本類似,，大致是通過臺盼蘭或者熒光染料染色后，用肉眼或者用攝像機(jī)拍照后進(jìn)行計(jì)數(shù),，差別就是前者人累,，且精準(zhǔn)度和穩(wěn)定性較差；后者不累人,，且精準(zhǔn)度和穩(wěn)定性較好,。
單細(xì)胞測序?qū)嶒?yàn)的第一步是單細(xì)胞懸液的制備，而懸液制備中細(xì)胞計(jì)數(shù)的準(zhǔn)確性直接影響單細(xì)胞測序的數(shù)據(jù)質(zhì)量,。
1. 計(jì)數(shù)板
用96%酒精沖洗計(jì)數(shù)板后,，用干凈鹿皮擦凈，另擦凈蓋片一張,；把蓋片覆在計(jì)數(shù)板上面,，使之微微移向一側(cè)，露出計(jì)數(shù)板臺面少許,，以便滴加細(xì)胞懸液,；
2. 染色
取吸管1 支，伸入培養(yǎng)瓶中,，輕輕反復(fù)吹打細(xì)胞懸液使細(xì)胞重懸均勻后,，立即吸細(xì)胞懸液少許，向另一離心管中滴入細(xì)胞懸液9 滴,，再滴入臺盼藍(lán)染液1 滴,，混勻，置2~3 分種,；
3. 加懸液
把計(jì)數(shù)板平放在顯微鏡臺上,，立即從計(jì)數(shù)板邊緣輕輕滴1~2 滴已染色的細(xì)胞懸液，使之充滿計(jì)數(shù)板和蓋片間空隙中,；
4. 鏡檢
鏡下觀察可見細(xì)胞分散各處,，健康細(xì)胞胞體完整，透明不著色，凡著色細(xì)胞均為不健康者,。計(jì)算四角大方格內(nèi)的細(xì)胞數(shù),；壓中線者只計(jì)算左線和上線者，右線和下線不計(jì)算在內(nèi)(即僅計(jì)算壓兩個邊的細(xì)胞),。
5. 接種培養(yǎng)
通過計(jì)數(shù)測知懸液中細(xì)胞數(shù)后,，可根據(jù)實(shí)驗(yàn)所需細(xì)胞數(shù)量向培養(yǎng)容器中接種。細(xì)胞接種數(shù)量隨實(shí)驗(yàn)?zāi)康?、血清含量和?xì)胞生物性狀而定,；一般接種量在1~10x105細(xì)胞/毫升范圍，實(shí)驗(yàn)周期短,，希望細(xì)胞增殖較快時,，接種量可大些。用含血清量大的培養(yǎng)液培養(yǎng)胚胎來源細(xì)胞,、無限細(xì)胞系和惡性細(xì)胞系時,，細(xì)胞接種數(shù)量不宜太大。
相關(guān)產(chǎn)品
免責(zé)聲明
- 凡本網(wǎng)注明“來源：化工儀器網(wǎng)”的所有作品,，均為浙江興旺寶明通網(wǎng)絡(luò)有限公司-化工儀器網(wǎng)合法擁有版權(quán)或有權(quán)使用的作品,，未經(jīng)本網(wǎng)授權(quán)不得轉(zhuǎn)載、摘編或利用其它方式使用上述作品,。已經(jīng)本網(wǎng)授權(quán)使用作品的,，應(yīng)在授權(quán)范圍內(nèi)使用，并注明“來源：化工儀器網(wǎng)”,。違反上述聲明者,，本網(wǎng)將追究其相關(guān)法律責(zé)任。
- 本網(wǎng)轉(zhuǎn)載并注明自其他來源（非化工儀器網(wǎng)）的作品,，目的在于傳遞更多信息,，并不代表本網(wǎng)贊同其觀點(diǎn)和對其真實(shí)性負(fù)責(zé)，不承擔(dān)此類作品侵權(quán)行為的直接責(zé)任及連帶責(zé)任,。其他媒體,、網(wǎng)站或個人從本網(wǎng)轉(zhuǎn)載時，必須保留本網(wǎng)注明的作品第一來源,，并自負(fù)版權(quán)等法律責(zé)任,。
- 如涉及作品內(nèi)容、版權(quán)等問題,，請?jiān)谧髌钒l(fā)表之日起一周內(nèi)與本網(wǎng)聯(lián)系,，否則視為放棄相關(guān)權(quán)利。
采購中心