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如何使用生化培養(yǎng)箱多管發(fā)酵法與濾膜法

來(lái)源:常州億通分析儀器制造有限公司   2022年09月14日 09:40  

  一,、多管發(fā)酵法

1.初發(fā)酵實(shí)驗(yàn)
生化培養(yǎng)箱發(fā)酵管內(nèi)裝有單倍或三倍乳糖蛋白胨培養(yǎng)液,,并在內(nèi)倒置有小玻璃管。每個(gè)樣品用三個(gè)不同的水樣量接種,,同一接種水樣量要有五管,,將水樣分別接種到裝有乳糖蛋白胨培養(yǎng)液的 生化培養(yǎng)箱發(fā)酵管中,在37℃±0.5℃下培養(yǎng)24h±2h,。乳糖能起選擇作用,,因?yàn)楹芏嗉?xì)菌不能發(fā)酵乳糖,而大腸菌群能發(fā)酵乳糖并產(chǎn)酸產(chǎn)氣,。培養(yǎng)液中加入溴甲酚紫作為酸度指示劑,,細(xì)菌產(chǎn)酸后,培養(yǎng)液即由原來(lái)的紫色變成黃色,。產(chǎn)酸產(chǎn)氣的發(fā)酵管表明試驗(yàn)陽(yáng)性,,如在倒管內(nèi)產(chǎn)氣不明顯,可輕拍發(fā)酵管,,有小氣泡升起為陽(yáng)性,。

2.復(fù)發(fā)酵實(shí)驗(yàn) 
輕微振蕩初發(fā)酵試驗(yàn)陽(yáng)性結(jié)果的 生化培養(yǎng)箱發(fā)酵管,用3mm接種環(huán)將培養(yǎng)物(2-3環(huán))轉(zhuǎn)接到EC培養(yǎng)液中,,在44.5℃±0.5℃下培養(yǎng)24h±2h(提高培養(yǎng)溫度可造成不利于來(lái)自自然環(huán)境的大腸菌群的生長(zhǎng)),。培養(yǎng)后立即觀察,發(fā)酵管產(chǎn)氣則證實(shí)為糞大腸菌群陽(yáng)性,。


二,、濾膜法
生化培養(yǎng)箱濾膜是一種微孔性濾膜,,孔徑0.45μm,。將水樣注入已滅菌的放有濾膜的過(guò)濾器中,經(jīng)過(guò)抽濾,,細(xì)菌即被截留在膜上,,然后將濾膜貼于M-FC培養(yǎng)基上,,在44.5℃±0.5℃下培養(yǎng)24 h±2h。糞大腸菌群菌落在M-FC培養(yǎng)基上呈藍(lán)色或藍(lán)綠色,,其他非糞大腸菌群菌落成灰色,、淡黃色或無(wú)色。正常情況下,,由于溫度和玫瑰酸鹽試劑的選擇性作用,,在M-FC培養(yǎng)基上很少見(jiàn)到非糞大腸菌菌落。

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