基于物質(zhì)對200~800nm光譜區(qū)輻射的吸收特性建立起來的分析測定方法稱為紫外-可見吸收光譜法或紫外-可見分光光度法,。紫外可見光分光光度計工作原理與紅外光譜,、拉曼光譜的工作原理近似,采用一定頻率的紫外可見光照射所需檢測的物質(zhì),,引起物質(zhì)中電子躍遷,,從而表現(xiàn)出隨著吸收波長變化而引起的光譜變化,記錄光譜變化形成分析數(shù)據(jù),。
紫外可見光分光光度計可以分為以下幾種:
1,、單光束UV:單光源發(fā)射單光束,全程密閉,,通過光柵,,照射樣品,最后由光電倍增管監(jiān)測器檢測,。
2,、比例雙光束UV:單光源單光束,,全程密閉,通過光柵,,加入棱鏡,,把光分為兩束,分別照射樣品與空白,,再合并光,,進(jìn)入光電倍增管檢測器,通過差減法計算結(jié)果,。
3,、雙光束UV:單光源單光束,全程密閉,,通過棱鏡分出兩道光,,分別通過一光柵,分別進(jìn)入各自的光點倍增管檢測器,。
4,、全波段UV:單光源單光束,樣品與空白暴露在空氣中,照射樣品,,開始進(jìn)入密閉箱,,通過光柵,進(jìn)入DAD檢測器,。
紫外可見光分光光度計可以分為以下幾種:
缺點:測完空白再測試樣品,,全波段分析時間較長(一般2min)。
2,、比例雙光束UV:單光源單光束,,全程密閉,通過光柵,,加入棱鏡,,把光分為兩束,分別照射樣品與空白,,再合并光,,進(jìn)入光電倍增管檢測器,通過差減法計算結(jié)果,。
好處:空白樣品同時檢測,。
缺點:靈敏度下降,全波段分析時間較長,。
3,、雙光束UV:單光源單光束,全程密閉,,通過棱鏡分出兩道光,,分別通過一光柵,分別進(jìn)入各自的光點倍增管檢測器,。
好處:加強靈敏度,,同時測量空白與樣品。
缺點:全波段分析時間較長,。
4,、全波段UV:單光源單光束,樣品與空白暴露在空氣中,照射樣品,,開始進(jìn)入密閉箱,,通過光柵,進(jìn)入DAD檢測器,。
好處:空白只需要檢測一次,,如果你愿意一輩子檢測這一次都可以。檢測樣品不密閉,,外界光線對其無影響,,使用方便且精確。分析任何波段或全波段不到1s,。
缺點:價格比較貴,。
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