分光光度計(jì)已經(jīng)成為現(xiàn)代分子生物實(shí)驗(yàn)室常規(guī)儀器,。常用于核酸,,蛋白定量以及細(xì)菌生長濃度的定量。
儀器主要由光源,、單色器,、樣品室、檢測器,、信號處理器和顯示與存儲系統(tǒng)組成
分光光度計(jì)采用一個(gè)可以產(chǎn)生多個(gè)波長的光源,,通過系列分光裝置,從而產(chǎn)生特定波長的光源,,光線透過測試的樣品后,,部分光線被吸收,計(jì)算樣品的吸光值,,從而轉(zhuǎn)化成樣品的濃度,。樣品的吸光值與樣品的濃度成正比,。
分光光度計(jì)是精密儀器,正確安裝,、使用和保養(yǎng)對保持儀器良好的性能和保證測試的準(zhǔn)確度有重要作用,。
1、防止光電管疲勞
當(dāng)儀器不測定時(shí)必須將比色皿暗箱蓋打開,,使光路切斷,,以延長光電管使用壽命。
2,、比色皿使用方法
?、倌帽壬髸r(shí),手指只能捏住比色皿的毛玻璃面,,不要碰比色皿的透光面,,以免沾污。
?、谇逑幢壬髸r(shí),,一般先用水沖洗,再用蒸餾水洗凈,。如,,比色皿被有機(jī)物沾污,可用鹽酸-乙醇混合洗滌液(1:2)浸泡片刻,,再用水沖洗,。不能用堿溶液或氧化性強(qiáng)的洗滌液洗比色皿,以免損壞,。也不能用毛刷清洗比色皿,,以免損傷它的透光面。每次做完實(shí)驗(yàn)時(shí),,應(yīng)立即洗凈比色皿,。
③比色皿外壁的水用擦鏡紙或細(xì)軟的吸水紙吸干,,以保護(hù)透光面,。
④測定有色溶液吸光度時(shí),,一定要用有色溶液洗比色皿內(nèi)壁幾次,,以免改變有色溶液的濃度。另外,,在測定一系列溶液的吸光度時(shí),,通常都按由稀到濃的順序測定,以減小測量誤差,。
?、菰趯?shí)際分析工作中,,通常根據(jù)溶液濃度的不同,選用液槽厚度不同的比色皿,,使溶液的吸光度控制在0.2~0.7,。
3、對儀器工作環(huán)境的要求分光光度計(jì)應(yīng)安裝在穩(wěn)定的工作臺上,,周圍不應(yīng)有強(qiáng)磁場,以防電磁干擾,,室內(nèi)溫度應(yīng)保持在10~30℃。
4,、室內(nèi)應(yīng)干燥,,相對濕度宜控制在<85 %,室內(nèi)應(yīng)無腐蝕性氣體,,光線不宜過強(qiáng)。
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