黃曲霉毒素B1屬于自然烈的致癌物質(zhì),。 它一般產(chǎn)生于玉米,，花生，巴西堅果和棉花種子中,。 鑒于這種霉菌毒素的毒性,，對黃曲霉毒素B1的為2ppb，對黃曲霉毒素總量的為4ppb,。

使用酶標(biāo)儀能夠快速而準(zhǔn)確的檢測谷物,，飼料和其他食品中的黃曲霉毒素B1。

檢測原理

黃曲霉毒素B1檢測試劑盒應(yīng)用直接競爭酶聯(lián)免疫吸附原理,。

（1）樣品提取液或黃曲霉B1標(biāo)準(zhǔn)品100ul與酶聯(lián)偶合物200ul,，混合后取100ul，

（2）加入到抗體包被的微孔中等待15分鐘,，

（3）洗板去除未參加抗原-抗體反應(yīng)的黃曲霉毒素B1,

（4）酶的底物100ul加入到微孔中,，等待5分鐘，顏色變?yōu)樗{(lán)色,，顏色的深淺與黃曲霉毒素B1的含量成反比,，

（5）加入終止液100ul，顏色變?yōu)辄S色,，

檢測步驟

1.取固體或液體樣品5ml,，加入25ml 70%的甲醇，混勻3分鐘,，靜止10分鐘,，過濾，收集濾液,，吸取100ul濾液加100ul分析緩沖液,，混勻。

2.取出綠色的稀釋孔和無色的有抗體包被的稀釋孔各放入一個板架上,。

3.吸取200ul酶聯(lián)偶合物加入到綠色的稀釋孔,，再吸取100ul標(biāo)樣（0、2,、5,、20、50ppb）,，和100ul步驟1的待檢混合樣,，混勻3次。

4.然后從300ul混合物中吸取100ul加入到無色的有抗體包被的稀釋孔中,，靜止15分鐘,。

5.將孔中的液體倒掉,，用蒸餾水沖洗每個孔，將微孔倒置于紙巾上把水吸干,。

6. 加入100ul底物,，放置5分鐘，顏色變?yōu)樗{(lán)色,。

7. 加入100ul終止液,，顏色變?yōu)辄S色,。

8. 上機檢測,，（酶標(biāo)儀濾鏡450nm，示差濾鏡630nm）

9. 稀釋倍數(shù)f：1

10. 定量限：生奶0.002ug/kg,，

11. 牛奶或花生醬≤20ug/kg,，合格，

12. 計算公式：X= c*f

注：

1. 酶聯(lián)偶合物25ml ：sensitive conjugate 底物15ml ：substrate 終止液15ml ：stop solution 分析緩沖液 15ml ：assay buffer

2. 試劑盒在使用前恢復(fù)到室溫（18~30度）,，使用完畢后,，放入2~8度冰箱冷藏

3. 標(biāo)樣中含有毒素，致癌性,，使用時戴好橡膠手套,、安全眼鏡、工作服等防護(hù)裝備

4. 在讀數(shù)前,，微孔中應(yīng)沒有氣泡,，否則影響分析結(jié)果

5. 標(biāo)準(zhǔn)曲線的相關(guān)系數(shù) r ≥0.9850

6. 嚴(yán)格遵守規(guī)定的操作時間，否則導(dǎo)致數(shù)據(jù)不精確