黃曲霉毒素B1屬于自然烈的致癌物質(zhì),。 它一般產(chǎn)生于玉米,，花生，巴西堅(jiān)果和棉花種子中,。 鑒于這種霉菌毒素的毒性,，對(duì)黃曲霉毒素B1的為2ppb，對(duì)黃曲霉毒素總量的為4ppb,。

使用酶標(biāo)儀能夠快速而準(zhǔn)確的檢測(cè)谷物,，飼料和其他食品中的黃曲霉毒素B1。

檢測(cè)原理

黃曲霉毒素B1檢測(cè)試劑盒應(yīng)用直接競(jìng)爭(zhēng)酶聯(lián)免疫吸附原理,。

（1）樣品提取液或黃曲霉B1標(biāo)準(zhǔn)品100ul與酶聯(lián)偶合物200ul,，混合后取100ul，

（2）加入到抗體包被的微孔中等待15分鐘,，

（3）洗板去除未參加抗原-抗體反應(yīng)的黃曲霉毒素B1,

（4）酶的底物100ul加入到微孔中,，等待5分鐘，顏色變?yōu)樗{(lán)色,，顏色的深淺與黃曲霉毒素B1的含量成反比,，

（5）加入終止液100ul,，顏色變?yōu)辄S色，

檢測(cè)步驟

1.取固體或液體樣品5ml,，加入25ml 70%的甲醇,，混勻3分鐘，靜止10分鐘,，過(guò)濾,，收集濾液，吸取100ul濾液加100ul分析緩沖液,，混勻,。

2.取出綠色的稀釋孔和無(wú)色的有抗體包被的稀釋孔各放入一個(gè)板架上。

3.吸取200ul酶聯(lián)偶合物加入到綠色的稀釋孔,，再吸取100ul標(biāo)樣（0,、2、5,、20,、50ppb），和100ul步驟1的待檢混合樣,，混勻3次,。

4.然后從300ul混合物中吸取100ul加入到無(wú)色的有抗體包被的稀釋孔中，靜止15分鐘,。

5.將孔中的液體倒掉,，用蒸餾水沖洗每個(gè)孔，將微孔倒置于紙巾上把水吸干,。

6. 加入100ul底物,，放置5分鐘，顏色變?yōu)樗{(lán)色,。

7. 加入100ul終止液,，顏色變?yōu)辄S色。

8. 上機(jī)檢測(cè),，（酶標(biāo)儀濾鏡450nm,，示差濾鏡630nm）

9. 稀釋倍數(shù)f：1

10. 定量限：生奶0.002ug/kg，

11. 牛奶或花生醬≤20ug/kg,，合格,，

12. 計(jì)算公式：X= c*f

注：

1. 酶聯(lián)偶合物25ml ：sensitive conjugate 底物15ml ：substrate 終止液15ml ：stop solution 分析緩沖液 15ml ：assay buffer

2. 試劑盒在使用前恢復(fù)到室溫（18~30度），使用完畢后,，放入2~8度冰箱冷藏

3. 標(biāo)樣中含有毒素,，致癌性，使用時(shí)戴好橡膠手套、安全眼鏡,、工作服等防護(hù)裝備

4. 在讀數(shù)前,，微孔中應(yīng)沒(méi)有氣泡，否則影響分析結(jié)果

5. 標(biāo)準(zhǔn)曲線的相關(guān)系數(shù) r ≥0.9850

6. 嚴(yán)格遵守規(guī)定的操作時(shí)間,，否則導(dǎo)致數(shù)據(jù)不精確