常用細胞核熒光染料的介紹及應(yīng)用
目前細胞核常用熒光染料有以下幾大類:吖啶橙、溴化乙錠和碘化丙啶,DAPI,、Hoechst染料,、EthD III、7-AAD,、RedDot1,,2等等。性能優(yōu)良細胞核熒光染料應(yīng)具有好的膜通透性,,高靈敏度,,快速的染核效率,良好的光穩(wěn)定性,,良好的生物相容性細胞毒性更小,波長更長的激發(fā)光和發(fā)射光等,。仔細分析目前國內(nèi)外市場上常用的細胞核熒光染料,,滿足以上要素的化合物體系為數(shù)不多,探究新的優(yōu)良的細胞核熒光染料是目前研究人員的共識,。然后,,進一步深層研究細胞核內(nèi)的生物機制。下文所述為目前市場上常用的細胞核熒光染料,,透膜的染料如下:
1,,吖啶橙:具有膜通透性,能透過細胞膜,,將核DNA和RNA分別染成綠色和紅色,,因此使細胞核呈綠色或黃綠色熒光,。
2,溴化乙錠:一種高度靈敏的熒光染色劑,,在標準302nm處激發(fā)出橙紅色信號,。
3,DAPI:一種可以穿透細胞膜的藍色熒光染料,,其與DNA結(jié)合后可以產(chǎn)生比DAPI自身強20多倍的熒光,,而與單鏈DNA結(jié)合無熒光的增強。DAPI對雙鏈DNA的染色靈敏度要高于EB和PI,,熒光強度比Hoechst低,,但光穩(wěn)定性高于Hoechst,。
4,Hoechst染料:一類在顯微觀察中標記DNA的熒光染料,,最常見的兩種是Hoechst33342,,Hoechst33258。這兩種染料都在紫外350nm處被激發(fā),,在461nm處最大發(fā)射光附近發(fā)射青/藍色熒光,。與DAPI相比,Hoechst33342加有乙基,,具有更強的親脂性,,因此能更好的透過完整的細胞膜,并且細胞毒性更小,。
5, RedDot 1染料:細胞核選擇性強,。RedDot染料可被幾種常見的激光激發(fā)并可在遠紅外區(qū)激發(fā)熒光。RedDot的紅色近紅外熒光有效的與其他常用熒光探針區(qū)分開來,。不透膜的染料,,如下:PI碘化丙啶:不能通過活細胞膜,但卻能穿過死細胞膜而對核染色,。PI作為紅色熒光復(fù)染劑,,經(jīng)常與Calcein-AM或者FDA等熒光探針合用,區(qū)分死/活細胞,。EthD III,、7-AAD、RedDot 2:不能透過活細胞膜,,但能將壞死細胞區(qū)分開來,;更適合凋亡壞死實驗的檢測。
水溶性SupRed650近紅外細胞核染料的介紹
SupRed650細胞核染料是一種水溶性染料,,同時也是一種聚集誘導(dǎo)發(fā)光染料,,具有以下特點:
1.高靈敏度
2.良好的膜通透性
3.快速的染核效率
4.良好的光穩(wěn)定性
5.良好的生物相容性
6.越聚越亮的優(yōu)勢
7.波長更長的激發(fā)光和發(fā)射光(625/650nm)
8.無背景,染色程序方法簡單,,無需洗滌,,易于操作。
供應(yīng)商:杭州新喬生物科技有限公司
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