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植物提取物中的蒽醌類及其苷大多數(shù)是黃色或橙紅色的，羥基蒽醌能溶于堿溶液中而顯紅或紫紅色,；蒽酚和二葸醌與堿液不顯紅色,，只能呈黃色,，需經(jīng)氧化成羥基蒽醌后才與堿作用顯紅色；羥基蒽醌類因結(jié)構(gòu)不同與乙酸鎂的甲醇溶液反應(yīng)可顯橙,、紅,、藍(lán)、紫等色,，根據(jù)此性質(zhì)可進(jìn)行比色測(cè)定,。
1．標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制
取經(jīng)五氧化二磷干燥24h的大黃素（或大黃酸、1,，8-=羥基蒽醌）對(duì)照品適量,，用堿液（Imol/L氫氧化鈉溶液或其與2%氫氧化銨溶液的混合溶液）或0.5%一1%乙酸鎂甲醇溶液定容，在500～550nm波長(zhǎng)處掃描,，在最大吸收波長(zhǎng)處測(cè)定吸光度,，以吸光度對(duì)濃度繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，線性范圍4～24ug/ml,。
2．游離蒽醌的測(cè)定
取藥物細(xì)粉或其制劑粉末適量(約相當(dāng)于游離蒽醌1. 5mg)加（或氯仿）溶解,，或用索氏提取器回流提取至提取液無(wú)色。將揮干,，殘?jiān)眉状既芙?，加乙酸鎂甲醇溶液至定容；或?qū)⑻崛∫阂迫敕忠郝┒分?，用堿液提取并定容,，比色測(cè)定,，依標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算含量,。
3．總蒽醌的測(cè)定
(1)先水解后提取 取供試品適量(約相當(dāng)于總蒽醌1.5mg)，用酸液（1—7. 5mol/L硫酸溶液或1.5～6mol/L鹽酸溶液）20～30ml,，水浴回流1～2h,，以使結(jié)合態(tài)的蒽醌苷水解，使葸醌游離,，再用（或氯仿）萃取,，并將過(guò)濾的藥物殘?jiān)盀V紙經(jīng)50℃干燥后用回流提取，待索氏提取器內(nèi)提取液無(wú)色,，合并液,，照游離蒽醌測(cè)定法測(cè)定。
對(duì)含還原型蒽酮苷（如番瀉苷）的樣品,，根據(jù)其可被氯化鐵氧化,，酸水解成氧化型蒽醌苷元這一原理，稱取供試品適量,，加水30ml超聲處理1 5-30min（提高溶解,、提取效率,，大大縮短溶解、提取時(shí)間）,，加10. 5%氯化鐵溶液20ml,，回流20～60min，加鹽酸1～3ml繼續(xù)回流30min,，放冷,，再進(jìn)行萃取與測(cè)定。
蒽醌類與堿液顯色后,，過(guò)氧化氫不能使其褪色,，而其他有色物質(zhì)可被其氧化褪色，對(duì)含有干擾測(cè)定成分的堿萃取液,，加1%過(guò)氧化氫溶液少量,，在沸水浴中加熱4min氧化，冷卻,，定容,，比色測(cè)定。
(2)先提取后水解 取供試品適量,，加甲醇（或乙醇,、氯仿等），對(duì)含葸醌的浸膏制劑,，超聲處理30min,，使溶解。對(duì)含蒽醌的原植物藥粉末制劑,，應(yīng)置索氏提取器中回流提取,，至提取液無(wú)色，將甲醇回收至干,，殘?jiān)盟嵋核?，（或氯仿）萃取，依法測(cè)定,。
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