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反相液相色譜柱過程中注意事項
1,、新c18反相液相色譜柱在使用前，須先用甲醇或乙腈試劑以20倍柱體積低流速沖洗,，作用是使固定相能充分潤濕,、碳鏈舒展*,，使色譜柱的性能達到狀態(tài)。具體操作是,，將配制好65%的乙腈/水沖洗后,，把色譜柱進口端連接在色譜儀上，出口端放空（不可連上檢測器,，以免污染了檢測器）,，以0.1ml/min~0.5ml/min的低流速將色譜柱中的清稀溶液吹干，過20分鐘后再接上檢測器,，以1.0ml/min的流速,，繼續(xù)沖洗2~8小時；
2,、反相液相色譜柱檢測分析樣品完畢后,，須沖洗色譜柱。尤其是流動相中含有酸或鹽時,，需將色譜柱中的酸或鹽沖洗干凈,，通常建議用10%甲醇水沖洗20倍柱體積；
3,、若c18反相液相色譜柱處于長期閑置狀態(tài)時,，要將色譜柱*沖洗，建議沖洗3-4小時以上,，zui后保存在純有機試劑或高比例的有機試劑溶液（如90%甲醇水）中,；
4、由于反相液相色譜柱的固定相疏水性較強,，在使用過程中盡量不要使用高水相條件,，若水相比例過高易引起固定相疏水塌陷，引起柱效迅速下降,，甚至造成不可逆的負面影響,；由于碳載量高，表現(xiàn)尤為明顯,，建議使用過程中水相比例不超過90%,；
5、c18反相液相色譜柱壓力升高,、柱性能下降：通常為色譜柱被污染,，對色譜柱進行再生處理可恢復(fù)部分柱效；
6,、反相液相色譜柱壓力驟升：通常由鹽析出或篩板堵塞引起,，若是鹽析出，用10%甲醇水低流速沖洗至壓力恢復(fù)即可,；若判斷并非鹽析出,，以純甲醇或10%甲醇水為流動相反沖色譜柱（將色譜柱反接，不接檢測器）,，若反沖半小時仍無效果則說明反沖無效,，需尋找其他原因。
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