導讀：

　　液質(zhì)聯(lián)用(LC-MS)又叫液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)，它以液相色譜作為分離系統(tǒng),，質(zhì)譜為檢測系統(tǒng),。待測物在質(zhì)譜部分和流動相分離，被離子化后,，經(jīng)質(zhì)譜的質(zhì)量分析器將離子碎片按質(zhì)量數(shù)分開,，經(jīng)檢測器得到質(zhì)譜圖。

　　液質(zhì)聯(lián)用體現(xiàn)色譜和質(zhì)譜優(yōu)勢互補,，將色譜對復雜樣品的高分離能力,，與MS高選擇性、高靈敏度,，以及提供相對分子質(zhì)量與結(jié)構(gòu)信息的優(yōu)點相結(jié)合,，在藥物分析、食品分析和環(huán)境分析等許多領(lǐng)域得到廣泛應用,。那么當我們使用液質(zhì)聯(lián)用儀時出現(xiàn)了響應異常,，我們應該以怎樣的思路去排查呢?

　　判斷哪個部位故障

　　液質(zhì)聯(lián)用儀由液相和質(zhì)譜兩部分組成，當儀器響應異常時,，首先應判斷是液相故障還是質(zhì)譜故障,。如果待測物和內(nèi)標物的響應比值穩(wěn)定，應首先考慮液相部分故障;如果比值較之儀器正常時有差異,，此時應考慮質(zhì)譜部分故障,。液相系統(tǒng)壓力是液相部分是否正常的重要指示參數(shù)。壓力異常升高,，提示液相系統(tǒng)存在堵塞;壓力異常降低,，提示系統(tǒng)可能存在泄露或柱塞泵工作異常。

　　針對液相,、質(zhì)譜兩個部分故障導致的響應異常,，筆者總結(jié)出以下排查方法。

　　液相部分故障排查方法 一,、樣品,、色譜柱故障排查①重新配置樣品;②更換流動相;③更換在線過濾器;④更換色譜柱。如遇故障,，可首先按以上方法逐一排查,。二、進樣量異常排查

　　①檢查是否樣品量過少,。樣品量過少的情況下會導致進樣針無法正常吸取到樣品,，對于樣品量少且難以獲得的，推薦使用高回收率樣品瓶;

　?、谶M樣注射器是否泄漏,，詳見下文液相進樣系統(tǒng)泄漏測試;

　　③進樣三通是否泄漏;

　?、軝z查樣品吸取速率是否設置異常,。對于不同粘度的樣品可能需要設置不同的吸樣速率，Waters推薦15µL進樣針為30µL/min,、30µL進樣針為120µL/min,。

　　三、系統(tǒng)漏液排查思路

　　注：此方法僅限執(zhí)行液相部分的泄漏測試

　?、贉y試柱塞泵是否正常,。因液相系統(tǒng)的壓力和梯度均由柱塞泵提供，所以應優(yōu)先測試柱塞泵是否正常;

　?、跍y試柱塞泵和進樣切換閥是否正常;

　?、壑谩⑦M樣切換閥,、進樣針,、針密封，逐段排查液相系統(tǒng)是否存在泄露,。

　　針對液相的整個流路及進樣部分,，以UNIFI系統(tǒng)為例，進行泄露測試的具體方法如下：

　　1,、液動相流路系統(tǒng)泄露測試

　　2,、在Binary Solvent Manager菜單中選中Maintain，在Maintain子菜單中單擊Leak Test,，如上圖所示,，設置測試壓力，選擇需要測試的柱塞泵(Pump),，在Fluidics end point復選框中勾選需要測試的結(jié)束點,，并確保Options復選框中勾選Prime選項,。

　?、貴luidics end point勾選Vent valve end point測試柱塞泵是否泄漏;

　　②Fluidics end point勾選Column end point測試進樣切換閥是否泄漏;

　?、跢luidics end point勾選Include needle and seal測試進樣針,、針密封是否泄漏。泄露測試應逐步進行，泵測試通過后進行切換閥測試,，切換閥測試通過后再進行針和針密封的測試,。

　　2、液相進樣系統(tǒng)泄露①Purge進樣注射器,，觀察FTN Sample Pressure圖,，如下所示：

　　正常的壓力圖應類似于矩形圖，壓力圖嚴重拖尾或不能穩(wěn)定壓力時應檢查連接進樣注射器的管路和進樣注射器是否泄露;

　?、谲浖y試在Sample Manager FTN菜單中選中Maintain,，在Maintain子菜單中單擊Leak Test。單擊Start,。Unifi軟件自動判斷否存在泄露,，結(jié)果顯示為Pass/Failed。

　　質(zhì)譜部分故障排查方法

　　一,、方法參數(shù)異常

　　此項異常需檢查質(zhì)譜采集方法參數(shù)是否被修改,，如毛細管電壓、錐孔電壓,、碰撞能量以及待測物的離子對信息,。

　　二、儀器反饋值異常

　?、贆z查毛細管電壓,。檢查probe的線纜連接、重置質(zhì)譜后再次測試儀器參數(shù)是否正常;②檢查錐孔電壓,。probe的線纜連接,、重置質(zhì)譜后再次測試儀器參數(shù)是否正常;

　　③檢查源溫度,。此項異常一般為加熱絲故障,，更換源加熱絲即可排除故障;

　　④檢查脫溶劑氣溫度等參數(shù)是否被正確的應用,。脫溶劑溫度如無法設置,，需先排查氣體流量是否正常，氣流量不正常時先檢查儀器氣體的壓力,。氣體流量正常的情況下可能是Adjust故障,，需要聯(lián)系工程師處理;

　　⑤在工程師界面,，檢查儀器T-Wave電壓反饋值是否正常,。

　　三、Prboe異常

　?、?毛細管噴霧異常,。如噴霧出現(xiàn)不連續(xù),、分叉等異常情況可以先將噴針用甲醇水溶液超聲清洗10-15min，如不能排除故障則需要更換噴針;

　?、?Probe氣流量設置異常,。如設置的參數(shù)未被正確應用，需檢查儀器所需氣體的壓力是否正常,。對于Waters的TQD和TQS儀器,，氮氣壓力為90-100Psi、氬氣壓力約為7Psi,，壓力不足的情況下儀器設置的參數(shù)無法正確應用,。

　　四、質(zhì)譜異常

　?、?通過PPG調(diào)諧液直接進質(zhì)譜查看儀器MS1,、MS2的響應強度、以及MS1,、MS2的質(zhì)量軸準確性,、半峰寬是否在0.6-0.8Da范圍內(nèi)。質(zhì)量軸偏差,、半峰寬設置不合適均會導致儀器響應異常;

　?、?調(diào)節(jié)CE參數(shù)排查碰撞池異常。如果提高碰撞能量,，MS2的響應明顯增高,，則碰撞池可能被污染。通過PPG溶液調(diào)諧查看質(zhì)譜的響應強度,，正常狀態(tài)MS2的響應強度應在MS1的1/2-2/3之間,。如果MS2響應強度明顯高于MS1，則MS1可能被污染,。如果MS1,、MS2響應強度均降低，響應強度的比值正常,，則可能是離子源,、T-Wave等被污染。此時可嘗試通過清洗離子源和T-Wave解決,，離子源可以采用50%甲醇水超聲清洗,，污染嚴重的情況下可以適當添加甲酸。如果添加甲酸需用超純水清洗2-3次,，再用純甲醇超聲清洗,。T-Wave只能使用純甲醇超聲清洗，清洗過程中需確保T-Wave不接觸量筒的底部,。清洗完成后使用干燥無油的氮氣吹干離子源和T-Wave,，至少吹20min,。

　　通過上述的故障排查思路總結(jié),，可以快速找到液質(zhì)聯(lián)用響應異常的原因,。可根據(jù)具體原因采取相應措施,，讓液質(zhì)聯(lián)用儀的檢測狀態(tài)盡快恢復到正常水平,。