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HPLC色譜柱(分離柱)是非常重要的部件之一,，一般可分為反相柱、正相柱、其他柱三類,。
①反相色譜柱：它是使用最多的一種色譜柱；一般約占70％,；其中,，C18柱約占65％；C8柱占15％左右,；苯基柱＜5％,。反相色譜是目前應(yīng)用得最為廣泛的一種高效液相色譜方法。C18在反相色譜中應(yīng)用得最為廣泛,。大概超過(guò)一半,。
②正相色譜柱：正相色譜柱也經(jīng)常被使用，它約占20％,。
③其他色譜柱(手性柱,、離子交換柱)：約占10％。
HPLC色譜柱的常見(jiàn)故障有哪些,？
1,、柱壓過(guò)高
可能是微粒堵塞． 柱床膨脹，不可逆吸附,， 細(xì)菌生長(zhǎng)等造成的,。也有可能是系統(tǒng)反壓?jiǎn)栴}， 例如阻尼器堵塞,，進(jìn)樣器堵塞,， 管路或連接口堵塞。 在線過(guò)濾器不干凈,， 壓力傳感器不準(zhǔn)確等,。
2、柱效低
可能是色譜柱被污染,、 過(guò)濾片部分堵塞,、色譜柱內(nèi)的死體積造成，例如流動(dòng)相pH值或者組成不合適造成固定相損失,。 流動(dòng)相急劇變化造成固定相物理?yè)p壞,， 機(jī)械振動(dòng)造成固定相產(chǎn)生裂縫，柱床收縮或干枯,。也有可能是儀器連接的問(wèn)題,， 認(rèn)真檢查進(jìn)樣器、檢測(cè)器,、 管路,、 保護(hù)柱和在線過(guò)濾器等是否連接好，也可能是色譜柱沒(méi)有平衡好， 進(jìn)樣量過(guò)大等問(wèn)題,。
3,、重復(fù)性差、不出峰,、回收率低
可能是色譜柱被污染,， 流動(dòng)相 pH值或者組成不合適造成固定相損失 ， 樣 品溶劑 不同或樣品本身不穩(wěn)定,， 固定 相極性過(guò)強(qiáng)或者流動(dòng)相極性過(guò)弱． 或者發(fā)生非特異性吸附,。也可能梯度實(shí)驗(yàn)時(shí)平衡時(shí)間不足，溫度波動(dòng),， 流動(dòng)相組成改變,， 樣品溶劑不同， 樣品穩(wěn)定性不好,，方法的開(kāi)發(fā)不好,， 緩沖液的酸堿度不合適或者緩沖能力不足。
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