嘔吐毒素親和柱的原理和使用注意事項
原理
樣品經(jīng)提取液提取,、過濾,、稀釋,,然后通過鍵合有嘔吐毒素特殊抗體的免疫親和柱,。此時,,嘔吐毒素被親和柱中的抗體特異性的吸附,用水或緩沖液將免疫親和柱IAC-SEP上的雜質(zhì)除去,,然后用甲醇使抗體變性,,從而將嘔吐毒素從親和柱上洗脫下來。最后,,用HPLC或熒光計進行定量檢測
注意事項
使用前,,免疫親和柱需回至室溫(22~25℃)。
樣品添加回收試驗時,,標準品添加到樣品中,,靜置2小時后或過夜,,再進行樣品前處理,,否則會出現(xiàn)回收率偏低的現(xiàn)象。
3) 操作步驟中,,樣品過柱,,淋洗,洗脫時,,一定要控制好流速,,不能太快,否則會使檢測結(jié)果偏低,。
4) 如果將標準品直接過柱驗證回收率時,,一定要確保標準上柱液中甲醇濃度不要超過5%,否則會影響柱子的吸附能力,。
5) 試驗中使用的玻璃儀器等,,一定要清洗干凈,尤其是用次氯酸等處理過的儀器,,否則會使檢測結(jié)果偏低,。
6) 當用氮氣濃縮洗脫液時,氮氣流不要太大,,否則會損失部分嘔吐毒素,。
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