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進(jìn)行脂溶性維生素實(shí)驗(yàn)可能會(huì)遇到哪些問(wèn)題
脂溶性維生素由長(zhǎng)的碳?xì)滏溁虺憝h(huán)組成的聚戊二烯化合物。脂溶性維生素包括維生素A,、D,、E和K,，它們都含有環(huán)結(jié)構(gòu)和長(zhǎng)的,、脂肪族烴鏈,，這四種維生素盡管每一種都至少有一個(gè)極性基團(tuán),，但都高度疏水的,。某些脂溶性維生素并不是輔酶的前體,，而且不用進(jìn)行化學(xué)修飾就可被生物體利用。
脂溶性維生素的樣品前處理過(guò)程分為溶解,、皂化,、萃取、水洗,、脫水和濃縮6個(gè)步驟,。
在進(jìn)行脂溶性維生素樣品試驗(yàn)的時(shí)候，可能會(huì)遇到哪些問(wèn)題
問(wèn)題一試樣處理過(guò)程中,，試樣不溶解于水,，或溶解不均勻,。
應(yīng)采取均勻取樣：對(duì)于脂肪含量高的樣品，可適當(dāng)減少取樣量,，防止樣品因皂化不*而出現(xiàn)氮吹后殘留油狀物質(zhì)的情況,。對(duì)于含淀粉的樣品，應(yīng)先酶解再進(jìn)行皂化,。對(duì)于不溶于水或溶解不均勻的樣品,，可先振蕩再進(jìn)行超聲溶解。
問(wèn)題二萃取及水洗過(guò)程中,，出現(xiàn)乳化現(xiàn)象,。
應(yīng)避免大力振搖分液漏斗，以防出現(xiàn)乳化現(xiàn)象而對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果造成影響,。若出現(xiàn)乳化現(xiàn)象,，可加入少量飽和食鹽水，并靜置直至分層,。
問(wèn)題三無(wú)法氮吹干,，或氮吹后底部殘留油狀物質(zhì)。
確保漏斗及雞心瓶干燥,。脫水過(guò)程中,，應(yīng)防止漏斗外壁的水流入雞心瓶中，以免出現(xiàn)氮吹不干的現(xiàn)象,。氮吹干后，應(yīng)根據(jù)樣品含量確定定容體積,。
問(wèn)題四實(shí)驗(yàn)過(guò)程中未考慮脂溶性維生素遇光,、遇氧、遇熱不穩(wěn)定的性質(zhì),，造成脂溶性維生素的損失,。
實(shí)驗(yàn)全程應(yīng)避光操作：皂化前需加入抗壞血酸，并充氮?dú)膺M(jìn)行保護(hù),。皂化完成后應(yīng)立即冷卻至室溫,，萃取完成后應(yīng)在40±2℃的條件下旋蒸至近干，但決不允許旋蒸干,。維生素A,、D、E,、K1的標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液-10℃以下避光保存且使用前需校正濃度,，標(biāo)準(zhǔn)工作液需臨用前配置。
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