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在實(shí)驗(yàn)室中,，用得最多的接種工具是接種環(huán)、接種針,。有時(shí)滴管,、吸管也可作為接種工具進(jìn)行液體接種。在固體培養(yǎng)基表面要將菌液均勻涂布時(shí),，需要用到涂布棒,。那么微生物檢驗(yàn)常見接種方法有哪些呢,？
(1)劃線接種法
平板劃線分離法--分區(qū)劃線分離法
①用接種環(huán)先將培養(yǎng)物涂布于平板1區(qū)并作數(shù)次劃線,，再在2、3……區(qū)依次劃線,；
②每劃完一個(gè)區(qū)域,，轉(zhuǎn)動(dòng)培養(yǎng)皿約70度角,，并將接種環(huán)滅菌一次,，待冷后再劃下一區(qū)域；
?、勖恳粎^(qū)域的劃線均接觸上一區(qū)域的接種線1～2次,，使接種量逐漸減少,，以獲得單個(gè)菌落,；
④其他操作與上述曲線劃線分離法相同,。
(2)斜面接種法
主要用于經(jīng)劃線分離培養(yǎng)所獲得的單個(gè)菌落的移種，以及觀察細(xì)菌的某些培養(yǎng)特征,。
以菌種移種為例,，其接種方法是：
?、偃∫痪N管和培養(yǎng)基管，置左手食指,、中指,、無名指間,，拇指壓住兩管底部上側(cè)面,，使菌種管位于外側(cè)，培養(yǎng)基管位于內(nèi)側(cè),；
②右手拇指和食指分別旋松兩管棉塞,?；鹧鏈缇臃N環(huán),；
③以右手小指與手掌,，小指與無名指分別夾取棉塞(先外管后內(nèi)管)，將兩管口迅速通過火焰1~2次,；
?、軐⒁褱缇慕臃N環(huán)伸入菌種管中,，從斜面上取菌少許，迅速伸入待接種的培養(yǎng)基管中,，在斜面底部向上劃一條直線，然后從底部起向上作曲折連續(xù)劃線,，直至斜面上方頂端；
?、萑〕鼋臃N環(huán),，火焰滅菌管口，塞上棉塞(先塞內(nèi)管)；最后將接種環(huán)經(jīng)火焰滅菌放好,；
?、拮龊脴?biāo)識(shí)，置35℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)18~24小時(shí),。斜面培養(yǎng)一般形成均勻一致的菌苔,。一般可觀察表面、透明度,、色澤等特征,。
(3)涂布接種法
涂布法接種是一種常用的接種方法，不僅可以用于計(jì)算活菌數(shù),，還可以利用其在平板表面生長(zhǎng)形成菌苔的特點(diǎn)用于檢測(cè)化學(xué)因素對(duì)微生物的抑殺效應(yīng),。
原理：將一定濃度，一定量的待分離菌液移到已凝固的培養(yǎng)基平板上,，再用涂布棒快速地將其均勻涂布,，使長(zhǎng)出單菌落而達(dá)到分離的目的。
(4)液體接種法(肉湯接種)
?、偃缧泵娼臃N法持好菌種管及培養(yǎng)基管；
?、跍缇臃N環(huán)，從菌種管取菌,，伸入培養(yǎng)基管中,，在接近液面的管壁上方輕輕研磨，并沾取少許培養(yǎng)基液體調(diào)和,，使細(xì)菌混合于培養(yǎng)基的液體中,。液體培養(yǎng)基一般以18~24小時(shí)培養(yǎng)后觀察生長(zhǎng)特征。
肉湯培養(yǎng)可觀察如下幾項(xiàng)：
a.發(fā)育程度：有無生長(zhǎng),、微弱、中等,、旺盛；
b.混濁度：有無及程度(混,、中等,、微混、透明),、均勻混濁、有顆粒,、絮狀生長(zhǎng),；
c.沉淀：有無及量多少,、性狀(粉狀,、顆粒狀,、絮狀、沾性),；
d.表面：有無生長(zhǎng)、性狀(膜狀,、環(huán)狀),、菌膜厚薄及表面特征(光滑,、顆粒、皺狀),；
e.其他：有無特殊氣味,，色素。如果是糖發(fā)酵培養(yǎng)基則主要觀察是否產(chǎn)酸和有無氣體,。
(5)穿刺接種法(半固體接種)
多用于保存菌種,、觀察動(dòng)力及厭氧培養(yǎng)等也可以用于觀察細(xì)菌的某些生化反應(yīng),。
①如斜面接種法持好菌種管及培養(yǎng)基管,；
②以滅菌接種針從菌種管取菌,，垂直刺入培養(yǎng)基的中心(半固體或一般瓊脂高層)直達(dá)近管底部(但不能*刺到管底)，接種針應(yīng)沿原路退出；
?、劢?jīng)培養(yǎng)后半固體培養(yǎng)基可觀察到：沿穿刺線生長(zhǎng)，線外的培養(yǎng)基清亮表示細(xì)菌無動(dòng)力,；穿刺線模糊不清，或沿穿刺線向外擴(kuò)散生長(zhǎng),，或整個(gè)培養(yǎng)基混濁表示細(xì)菌有動(dòng)力,。
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