細(xì)胞培養(yǎng)基pH值改變的原因及解決辦法

來源：重慶市華雅干細(xì)胞技術(shù)有限公司 2022年04月12日 14:42

pH值升高都有哪些原因,？

①隨著培養(yǎng)基開蓋時間的增長，pH值會不斷升高,；

---培養(yǎng)基中CO2揮發(fā),，導(dǎo)致溶液堿性升高,。

②培養(yǎng)基存儲條件不合適；

③操作時間過長,。

如何解決pH值升高的問題,？

①*培養(yǎng)基盡量現(xiàn)配現(xiàn)用，2~8℃下保存一周內(nèi)使用完,；

②培養(yǎng)基在2~8℃下避光保存,；

③避免操作時間過長。操作時間快速,、減少同時進行的實驗數(shù)量,。

pH值降低都有哪些原因,？

①在細(xì)胞生長過程中，產(chǎn)生細(xì)胞代謝產(chǎn)物乳酸,，乳酸蓄積,，pH值通常會下降；

②培養(yǎng)瓶蓋擰得過緊,；

---細(xì)胞代謝產(chǎn)生的CO2無法溢出,，溶解于培養(yǎng)基中導(dǎo)致酸性變強。

③NaHCO3緩沖系統(tǒng)緩沖能力不夠,；

④細(xì)菌,、酵母或真菌污染等。

如何解決pH值降低的問題,？

①及時傳代,、提高傳代比例或降低血清量；

②適當(dāng)松開瓶蓋,；

③增加培養(yǎng)液中NaHCO3濃度或減少培養(yǎng)箱內(nèi)CO2濃度（NaHCO3含量在2.0g/L到3.7g/L之間時，對應(yīng)的CO2濃度為5~10%）,；

④若是微生物污染造成的,，需及時丟棄培養(yǎng)基，并對操作,、培養(yǎng)空間進行消毒處理,。

在什么情況下選擇HEPES緩沖體系呢？

在開放式培養(yǎng)條件下（非5%CO2的培養(yǎng)環(huán)境）,，細(xì)胞代謝產(chǎn)生的CO2迅速溢出,，pH迅速升高，使用HEPES緩沖液體系,，可以防止培養(yǎng)基pH值迅速變動,。

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