Colorcode Prestained Protein Marker (15-130 kDa) 彩色預(yù)染蛋白質(zhì)Marker (15-130 kDa)
多肽修飾主要是肽鏈主鏈結(jié)構(gòu)和側(cè)鏈基團(tuán)的修飾,。通過修飾能夠改變肽類化合物的物理化學(xué)性質(zhì),優(yōu)化其在體內(nèi)的有效利用,。經(jīng)過修飾的多肽類藥物,,能夠顯著降低免疫原性、減少毒負(fù)作用,、增加水溶性,、延長體內(nèi)作用時間、改變體內(nèi)分布狀況等等,。目前多肽標(biāo)記及修飾的內(nèi)容非常多,,廣泛應(yīng)用在多肽藥物,多肽生物學(xué),,多肽抗體以及多肽試劑的研究中,。目前應(yīng)用廣泛的有:非放射性核素標(biāo)記(C13,H2),,熒光標(biāo)記(FAM,,F(xiàn)ITC),生物素標(biāo)記,,磷酸化修飾等。
熒光標(biāo)記由于沒有放射性,,實驗操作簡單,。因此,目前在生物學(xué)研究中熒光標(biāo)記應(yīng)用非常廣泛,熒光標(biāo)記方法與熒光試劑的結(jié)構(gòu)有關(guān)系,,對于有游離羧基的采用的方法與接肽反應(yīng)相同,,也采用HBTU/HOBt/DIEA方法連接。但是對于FITC標(biāo)記,,需要在連接FITC前,,增加一個氨基己酸,避免在切割的過程中被TFA切割掉,。
如何選擇合適的熒光標(biāo)記基團(tuán)取決于您的實驗需求,。
藥理學(xué)實驗研究基本分為體內(nèi)研究和體外研究兩大類。
對于體內(nèi)研究,,一般選擇發(fā)射波長在650-900nm的熒光基團(tuán),,例如:ICG、Cy5.5和 Nile Blue,。這是因為這類基團(tuán)所發(fā)出的熒光具有較好的組織穿透能力,,受背景干擾較小(水、血紅蛋白和脫氧血紅蛋白一般都會產(chǎn)生背景干擾吸收,,其區(qū)域在560nm左右),。
對于體外研究,發(fā)射波長在400到600nm的熒光基團(tuán)最為常用,,例如:AMC,、FITC和TAMRA。
熒光標(biāo)記的多肽在現(xiàn)代醫(yī)學(xué)中的應(yīng)用是很廣泛的,。例如:用Cy5.5標(biāo)記的目標(biāo)多肽研究對 c-Met受體的綁定作用,。有人設(shè)計含有KSLSRHDHIHHH序列的cMBP,其C端為GGGSC,, C端Cys用 Cy5.5-Maleimide標(biāo)記其巰基側(cè)鏈,。研究結(jié)果表明:上述Cy5.5-cMBP多肽與U87MG腫瘤細(xì)胞共孵24小時后,具有較高的癌細(xì)胞攝取值,,其響應(yīng)濃度在納摩爾級別,。多肽保存
為了防止或盡量減少多肽降解,請將多肽以凍干粉形式保存在-20°C,,-80°C更佳,。如果需要保存溶液肽,最好分成小樣存放,,以避免反復(fù)凍融,。一份樣品融凍后未用完,應(yīng)扔掉,。細(xì)菌降解有時會成為溶液肽的麻煩,,所以請將肽溶于無菌水或肽溶液過濾除菌,。
多肽保存方法建議
所有的凍干多肽產(chǎn)品可以在常溫下避光運輸,并可以在室溫條件下保存幾天或者少于一個星期,,多肽性狀是穩(wěn)定的,。所有的凍干多肽產(chǎn)品,都必須保存在干燥低溫的條件下,,以-20℃的低溫為佳,,若有條件最好保存在-80℃以下,在這樣的條件下大多數(shù)多肽可存放1-2年,。
當(dāng)需要使用多肽產(chǎn)品時,,應(yīng)在開蓋之前將多肽產(chǎn)品升至室溫;對保存于-20℃的產(chǎn)品,,該過程需要1h或更長,,因包裝大小而異。否則,,當(dāng)打開瓶蓋時,,水氣進(jìn)入會導(dǎo)致多肽凝縮而降低其穩(wěn)定性。一旦打開,,應(yīng)迅速稱量完畢,,并立即密閉以免潮解,親水肽尤其應(yīng)注意,。
對序列中含有Cys,、Met、Try的易氧化多肽和含有Gln,、Asn,、Asp的易降解多肽,應(yīng)避免反復(fù)融凍,,以免多肽被氧化和降解,,因此建議分裝成小包裝保存。需要多少解凍多少,,用后棄去,,不要保存。
對于暫時不用的多肽,,不要以溶液的形式保存(即使在-80°C的條件下),。
相關(guān)產(chǎn)品
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