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細(xì)胞難伺候,你真的會選培養(yǎng)基嗎?

來源:上海復(fù)祥生物科技有限公司   2022年03月25日 13:58  
  培養(yǎng)基的配制
  培養(yǎng)基可按處方配制,也可使用按處方生產(chǎn)的符合規(guī)定的脫水培養(yǎng)基,。
  在制備培養(yǎng)基時,,應(yīng)選擇質(zhì)量符合要求的脫水培養(yǎng)基或單獨(dú)配方組分進(jìn)行配制,。脫水培養(yǎng)基應(yīng)附有處方和使用說明,配制時應(yīng)按使用說明上的要求操作以確保培養(yǎng)基的質(zhì)量符合要求,,不得使用結(jié)塊或顏色發(fā)生改變的脫水培養(yǎng)基,。脫水培養(yǎng)基或單獨(dú)配方組分應(yīng)在適當(dāng)?shù)臈l件下儲存,如低溫,、干燥和避光,,所有的容器應(yīng)密封,尤其是盛放脫水培養(yǎng)基的容器,。商品化的成品培養(yǎng)基除了應(yīng)附有處方和使用說明外,,還應(yīng)注明有效期、貯存條件,、適用性檢查試驗的質(zhì)控菌和用途,。
  為保證培養(yǎng)基質(zhì)量的穩(wěn)定可靠,各脫水培養(yǎng)基或各配方組分應(yīng)準(zhǔn)確稱量,,并要求有一定的精確度,。配制培養(yǎng)基常用的溶劑是純化水,特殊情況下,,可能需要用去離子水和蒸餾水,。應(yīng)記錄各稱量物的重量和水的使用量。配制培養(yǎng)基所用容器和配套器具應(yīng)潔凈,,可用純化水沖洗玻璃器皿以消除清潔劑和外來物質(zhì)的殘留,。對熱敏感的培養(yǎng)基如糖發(fā)酵培養(yǎng)基其分裝容器一般應(yīng)預(yù)先進(jìn)行滅菌,以保證培養(yǎng)基的無菌性,。
  脫水型培養(yǎng)基應(yīng)*溶解于水中,,再行分裝與滅菌。配制時若需要加熱助溶,,應(yīng)注意不要過度加熱,以避免培養(yǎng)基顏色變深,。如需要添加其它組分時,,加入后應(yīng)充分混勻。
  應(yīng)按照生產(chǎn)商提供或使用者驗證的參數(shù)進(jìn)行培養(yǎng)基的滅菌,。商品化的成品培養(yǎng)基必須附有所用滅菌方法的資料,。培養(yǎng)基滅菌一般采用濕熱滅菌技術(shù),,特殊培養(yǎng)基可采用薄膜過濾除菌。
  培養(yǎng)基若采用不適當(dāng)?shù)募訜岷蜏缇鷹l件,,有可能引起顏色變化,、透明度降低、瓊脂凝固力或pH的改變,。因此,,培養(yǎng)基應(yīng)采用驗證的滅菌程序滅菌,培養(yǎng)基滅菌方法和條件,,應(yīng)通過無菌性試驗和促生長試驗進(jìn)行驗證,。此外,對高壓滅菌器的蒸汽循環(huán)系統(tǒng)也要加以驗證,,以保證在一定裝載方式下的正常熱分布,。溫度緩慢上升的高壓滅菌器可能導(dǎo)致培養(yǎng)基的過熱,過度滅菌可能會破壞絕大多數(shù)的細(xì)菌和真菌培養(yǎng)基促生長的質(zhì)量,。滅菌器中培養(yǎng)基的容積和裝載方式也將影響加熱的速度,。因此,應(yīng)根據(jù)滅菌培養(yǎng)基的特性,,進(jìn)行全面的滅菌程序驗證,。,
  應(yīng)確定每批培養(yǎng)基滅菌后的pH(冷卻至室溫25℃測定)。若培養(yǎng)基處方中列出pH的范圍,,除非經(jīng)驗證表明培養(yǎng)基的pH允許的變化范圍很寬,,否則,pH的范圍不能超過規(guī)定的±0.2,。
  制成平板或分裝于試管的培養(yǎng)基應(yīng)進(jìn)行下列檢查:容器和蓋子不得破裂,,裝量應(yīng)相同,盡量避免形成氣泡,,固體培養(yǎng)基表面不得產(chǎn)生裂縫或漣漪,,在冷藏溫度下不得形成結(jié)晶,不得污染微生物等,。應(yīng)檢查和記錄批數(shù)量,、有效期及培養(yǎng)基的無菌檢查。
  培養(yǎng)基的貯存
  自配的培養(yǎng)基應(yīng)標(biāo)記名稱,、批號,、配制日期等信息,并在已驗證的條件下貯藏,。商品化的成品培養(yǎng)基標(biāo)簽上應(yīng)標(biāo)有名稱,、批號、生產(chǎn)日期、失效期及培養(yǎng)基的有關(guān)特性,,生產(chǎn)商和使用者應(yīng)根據(jù)培養(yǎng)基使用說明書上的要求進(jìn)行保存,,所采用的保藏和運(yùn)輸條件應(yīng)使成品培養(yǎng)基低限度的失去水分并提供機(jī)械保護(hù)。
  培養(yǎng)基滅菌后若儲藏在高壓滅菌器中,,質(zhì)量可能會受影響,,一般不提倡這種存放法。瓊脂培養(yǎng)基不得在0℃或0℃以下存放,,因為冷凍可能破壞凝膠特性,。
  培養(yǎng)基應(yīng)避光保存,若要長期保存,,應(yīng)置于密閉容器中以防止水分流失,。瓊脂平板最好現(xiàn)配現(xiàn)用,如置冰箱保存,,一般不超過一周,,且應(yīng)密閉包裝,若延長保存,,保存期需經(jīng)驗證確定,。
  固體培養(yǎng)基滅菌后的再融化只允許一次,以避免因過度受熱造成培養(yǎng)基質(zhì)量下降或微生物污染,。培養(yǎng)基的再融化一般采用的水浴加熱或流通蒸汽,。若使用微波爐,應(yīng)避免培養(yǎng)基過度受熱及水分的蒸發(fā),,更要注意安全,。融化的培養(yǎng)基應(yīng)置于45~50℃的水浴中,不得超過8小時,。傾注培養(yǎng)基時,,應(yīng)擦干培養(yǎng)基容器外表面的水分,避免容器外壁的水滴進(jìn)入培養(yǎng)基中造成污染,。
  使用過的培養(yǎng)基(包括失效的培養(yǎng)基)應(yīng)按照國家污染廢物處理相關(guān)規(guī)定進(jìn)行處理,。

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