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細(xì)胞搖瓶中的懸浮細(xì)胞需要消化嗎

來源:洛陽富道細(xì)胞工程技術(shù)有限公司   2022年03月09日 08:50  

細(xì)胞搖瓶是培養(yǎng)懸浮細(xì)胞常用的一種細(xì)胞培養(yǎng)耗材,,不同于貼壁細(xì)胞,懸浮細(xì)胞不依賴于支持物表面,,在培養(yǎng)液中呈懸浮狀態(tài)生長,。在細(xì)胞傳代前首先要消化細(xì)胞,那么,,如何消化懸浮細(xì)胞呢,?

125ml細(xì)胞搖瓶

三角細(xì)胞搖瓶125ml

從懸浮細(xì)胞的定義上來說,懸浮細(xì)胞是不貼壁的,,所以它不需要酶的作用就可以使其從細(xì)胞搖瓶表面脫離,。一般實(shí)驗(yàn)室中常用直接傳代法和離心傳代法(在發(fā)現(xiàn)有細(xì)胞碎片的情況下)來處理懸浮細(xì)胞,當(dāng)我們觀察到懸浮細(xì)胞已經(jīng)長滿至 80%~90%(細(xì)胞懸液變黃)的時(shí)候,,細(xì)胞就可以進(jìn)行傳代操作了。

500ml細(xì)胞搖瓶

三角細(xì)胞搖瓶500ml

從顯微鏡下觀察,如果沒有細(xì)胞碎片,、細(xì)胞形態(tài)規(guī)則,,就可以選擇直接傳代法,。將原瓶中的培養(yǎng)基按比例分裝到新的培養(yǎng)瓶中,,然后補(bǔ)加新鮮培養(yǎng)基,,然后隔天觀察細(xì)胞密度來考慮是否需要補(bǔ)液,。如果從顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)較差時(shí),,則需要使用離心傳代法,,首先,將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),,1000rpm 離心 5 min,;然后棄去上層清液,輕輕地將細(xì)胞沉淀彈散,,使用新鮮的培養(yǎng)基重懸細(xì)胞,;用吸管吸取適量細(xì)胞懸液,裝入新的培養(yǎng)瓶,,再加入適量的新鮮培養(yǎng)基,,繼續(xù)培養(yǎng)。


PETG血清培養(yǎng)基瓶

由于懸浮細(xì)胞自身的特點(diǎn),,所以細(xì)胞搖瓶中的細(xì)胞進(jìn)行傳代前不需要消化,根據(jù)細(xì)胞生長狀態(tài)選擇直接傳代法或離心傳代法進(jìn)行操作就可以了,。


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