基質(zhì)輔助激光解吸電離飛行時間質(zhì)譜(matrix-assisted laser desorption ionization time-of-flight mass spectrometry),,MALDI是軟電離的原理,,一般用來分析生物大分子,比如細 菌,、病毒,、蛋白質(zhì),、DNA、糖化血紅蛋白等,,也可以用來做病理切片的質(zhì)譜成像,。
糖基化是向蛋白質(zhì)和其他生物分子中添加碳水化合物分子的過程,是在生命系統(tǒng)中發(fā)現(xiàn)的z常見的翻譯后修飾之一,。據(jù)一些估計,,人體中發(fā)現(xiàn)的蛋白質(zhì)中有50%以上是通過糖基化修飾的。存在許多糖基化途徑,,因為它們的多樣性不jin 限于糖的身份,;它們的連接鍵(O或N連接的聚糖),鏈長(多糖鍵的長短)和聚糖鏈的支鏈也可能不同,。糖基化分子在細胞識別中起著至關重要的作用,,因為細胞用來彼此區(qū)分的是細胞表面的聚糖。由于某些遺傳性疾病,,獲得性(非遺傳性)疾病和癌癥具有特定的細胞表面聚糖譜,,因此可以利用它來確定單個細胞和整個生物的健康狀況。準確鑒定,,分類和檢測這些聚糖可以改 善診斷,,并指導從業(yè)人員為其患者尋求z有效的療法。
在進行MALDI-TOF-MS分析之前,,需要從與之共價鍵合的蛋白質(zhì)上切除聚糖成分,。 從母體蛋白中提取聚糖的化學和酶促途徑均存在。 這些提取完成后,,即可使用固相提?。⊿PE)進行聚糖本身的分離。 在這種情況下,,例如,,固相吸附劑將選擇性地結(jié)合在中性條件下存在于溶液中的聚糖,但會在酸性條件下釋放它們,,從而使聚糖從本體溶液中分離出來,。 分離后,分析物可能必須溶解在與質(zhì)譜兼容的替代溶劑中,,這需要干燥步驟,。 對于MALDI電鍍,需要將基質(zhì)和分析物混合物小心地添加到MALDI板上,,這些添加的順序和時間在所得質(zhì)譜圖的質(zhì)量中起著重要作用,。
完成MALDI-TOF-MS的步驟都需要人工干預,并且可能非常耗時,。對于MALDI點樣,,樣品的鍍層是一項微妙而費力的工作,,需要跟蹤板上的分析物和基質(zhì)混合物。由于這些原因,,許多實驗室都轉(zhuǎn)向自動化液體處理工作站,,以自動化其樣品制備來進行質(zhì)譜分析。這些系統(tǒng)增加了工作流程和通量,,提高了整體實驗室效率和樣品周轉(zhuǎn)時間,。如果您想進一步了解這些液體處理工作站如何簡化您的流程,請與我們的Aurora團隊聯(lián)系,。
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