液相色譜儀的系統(tǒng)由儲(chǔ)液器,、泵,、進(jìn)樣器、色譜柱,、檢測器,、記錄儀等幾部分組成。作為一種高精密儀器,,液相色譜儀在使用過程中不按照正確方法操作的話,,就容易導(dǎo)致一些問題。常見的有,、柱壓問題,、漂移問題、峰形異常問題,。
下面介紹一些液相色譜儀常見的峰形以及可能的原因:
1. 未出峰
可能的原因:
a. 未成功進(jìn)樣,,或樣品未溶解進(jìn)溶劑中,,或樣品分解變質(zhì)或樣品濃度太低;
b. 液相色譜儀器本身的問題:泵或者檢測器故障,;
c. 流動(dòng)相選擇不合適,,如對(duì)于反相硅膠柱來說,若流動(dòng)相極性太大,,是沖不下來一些小極性的物質(zhì)的,,物質(zhì)一直保留在柱子中,因而不出峰;
d. 檢測器不合適,,如有些產(chǎn)品沒有紫外吸收或者吸收很弱,,但是檢測還使用了UV檢測器;
2.平頭峰
可能的原因:
a. 樣品濃度過大或進(jìn)樣體積太大,,這個(gè)也是大多數(shù)原因,;
b. 液相色譜儀檢測器設(shè)置不正確;
3.負(fù)峰
可能的原因:
a. 流動(dòng)相吸收本底值過高,;
b. 進(jìn)樣過程中進(jìn)入空氣,;
c. 樣品組分的吸收低于流動(dòng)相;
d. 配制樣品的溶劑與流動(dòng)相不一致,;
4.肩峰
可能的原因:
a. 進(jìn)樣量過大,,樣品濃度過高;
b. 保護(hù)柱或色譜柱柱頭堵塞,;
c. 保護(hù)拄或色譜柱污染或失效,;
d. 色譜柱柱頭塌陷;
5.裂峰
可能的原因:
a. 溶劑效應(yīng):溶解樣品用的溶劑和起始流動(dòng)相極性相差太大,;
b. 保護(hù)柱或色譜柱柱頭堵塞,;
c. 保護(hù)拄或色譜柱污染或失效;
d. 色譜柱柱頭塌陷,;
6.鬼峰
可能的原因:
鬼峰(ghost peak)是在某個(gè)譜圖里出現(xiàn),,可能同樣的條件再做一次又不出現(xiàn)了,時(shí)有時(shí)無的峰,。
a. 進(jìn)樣閥殘余峰,,在每次進(jìn)完樣后用充足的時(shí)間來平衡和清洗系統(tǒng);
b. 樣品中存在未知物,,改進(jìn)樣品的預(yù)處理,;
c. 流動(dòng)相污染,更換新流動(dòng)相(或者換品牌),;盡可能現(xiàn)配現(xiàn)用,隔夜的流動(dòng)相再次使用時(shí)要過濾,;
d. 流路中有小的氣泡,打開Purge閥,,加大流速排除,;
7. 前伸峰
可能的原因:
a. 進(jìn)樣量或樣品濃度高,;
b. 溶解樣品的溶劑比流動(dòng)相極性強(qiáng);
c. 保護(hù)拄或色譜柱污染或失效,;
d. 流動(dòng)相不合適,,更換新流動(dòng)相(調(diào)pH或換種類、比例等),;
8. 拖尾峰
可能的原因:
a. 進(jìn)樣量或樣品濃度高,;
b. 流動(dòng)相不合適,更換新流動(dòng)相(調(diào)pH或換種類,、比例等),;
c. 硅羥基作用:加入三乙胺,用堿致鈍化柱增加緩沖液或鹽的濃度降低流動(dòng)相pH值,,鈍化樣品,;
d. 柱內(nèi)燒結(jié)不銹鋼失效:更換燒結(jié)不銹鋼,加在線過濾器,過濾樣品,;
e. 色譜柱柱頭塌陷或柱效下降:更換色譜柱
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