凝膠成像儀是一款用于電泳結(jié)束后對凝膠譜帶的觀察,、拍攝和分析的儀器。主要用于蛋白質(zhì),、核酸凝膠成像及分析,,系統(tǒng)提供白光和紫外光以及藍光光源進行拍攝凝膠,由系統(tǒng)自帶的圖像捕捉軟件捕捉拍攝圖像,,然后由系統(tǒng)自帶的圖像分析軟件對拍攝的圖像進行分析,。
使用凝膠成像儀時,需要按正確的步驟來操作,,避免因不恰當操作而造成的儀器損壞,。操作步驟如下:
在初次使用,都是按正常的流程打開凝膠成像儀電源開關(guān),,打開電腦,,并進入成像軟件。根據(jù)自己的實際需求,,選擇雙擊桌面的圖表軟件,按流程操作,。
1,、ECL拍攝
將拍攝模式切換為“ECL模式”,將濾光輪轉(zhuǎn)到ECL位,。選擇合適拍攝分辨率(有像素合并功能的機器都有這個功能),,點擊“啟動”。將樣品放置在樣品臺正中間,,調(diào)整鏡頭的焦距使樣品占據(jù)窗口約80%左右,,然后點擊“自動曝光”,勾掉“負片”并調(diào)整聚焦使預(yù)覽窗口中的樣品圖像清晰.(光圈越大,,自動曝光所需時間越短,。)并先用單幀拍攝,拍攝一張Mark照片,。關(guān)閉反射白光后給放置在化學發(fā)光成像板上的纖維素膜均勻加上發(fā)光液,。將拍攝方式設(shè)置為“規(guī)則積分”,勾上“負片”,,并設(shè)置的時間和張數(shù),,點擊“拍攝”按鈕即可,。
2、普通凝膠拍攝
(1)將拍攝模式切換為“普通模式”,,凝膠成像儀,,將濾光輪轉(zhuǎn)到UV位(無綠光鏡輪的無需調(diào)整)。
(2)選擇合適拍攝分辨率(機器有像素合并功能),,點擊“啟動”,。
(3)DNA膠拍攝:將DNA膠放置在紫外臺正中間,調(diào)整焦距使樣品占據(jù)窗口約80%左右,,然后點擊“自動曝光”,,并調(diào)整聚焦使預(yù)覽窗口中的樣品圖像清晰.然后關(guān)閉反射白光,開啟透射紫外,,并微調(diào),,確保在紫外下處于清晰狀態(tài)。
(4)蛋白質(zhì)膠拍攝:將蛋白質(zhì)膠放在拆疊白光板的中間,,關(guān)閉反射白光,,開啟透射白光,然后點擊“自動曝光”,,并調(diào)整聚焦使預(yù)覽窗口中的樣品圖像清晰,。
(5)在軟件界面點擊“拍攝”按鈕即可。
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