細胞培養(yǎng)的規(guī)模可大可小,,你既可以使用生物反應器,,也可以使用培養(yǎng)瓶或多孔板。如今,,利用多孔板的細胞培養(yǎng)模式正倍受青睞,,因為這有助于研究多個動態(tài)變量,減少實驗時間,,并節(jié)約昂貴的試劑,。除了標準的高通量微孔板,,還有一些特殊的微孔板被開發(fā)出來,助力3D和器官型細胞培養(yǎng),。
市場上的細胞培養(yǎng)板可不少,,如何選擇合適的呢?在這篇文章中,,BrandTech Scientific的產(chǎn)品專家介紹了細胞培養(yǎng)中塑料制品的選購要點,。在他們看來,我們需要重點考慮孔的數(shù)量,、孔的形狀,、微孔板顏色以及表面處理。
1. 孔的數(shù)量
大多數(shù)用戶在組織培養(yǎng)瓶上開始組織培養(yǎng),。不過,,許多應用也需要多孔板。理想的數(shù)量嘛,,取決于你所需的通量水平,,以及是否有機器人的協(xié)助。*手動地向96孔板中添加試劑,,這并非不可行,,但有電動移液器或機器人的幫助當然更好。擴展到384孔板,,就更加需要機器人,,而1536孔板更是絕對需要。當然,,高密度多孔板的挑戰(zhàn)還在于分析小型化,。
2. 孔的形狀
孔的底部可以選擇平的、圓的,,或錐形的,,這取決于細胞類型和下游應用。對于傳統(tǒng)的2D細胞培養(yǎng)(如HeLa或MDCK細胞),,特別是需要對培養(yǎng)物進行成像或分光光度測定,,通常首先選平底(F-bottom)。對于不存在接觸抑制的細胞,,弧形底(C-bottom)也不錯,。圓底(U-bottom)適合懸浮培養(yǎng)(如球體細胞培養(yǎng)),因為圓的表面讓細胞難以附著和生長,。而錐形底很少用于細胞培養(yǎng)實驗,,但在細胞沉淀時可能有用。
3. 微孔板的顏色
多孔板的顏色也與應用息息相關。如果用相差顯微鏡或肉眼觀察細胞,,可選擇透明的多孔板,。不過,對于可見光光譜以外的應用(如冷光或熒光),,有顏色的多孔板(如白色或黑色)則是必需的,。在使用從頂部讀數(shù)的儀器時,底部應該是不透明的,,而使用顯微鏡或底部讀數(shù)的儀器時,,應選擇底部透明的多孔板。冷光樣品通常選擇白色表面,,以便最大限度提高信號的反射率,,而大于300 nm的熒光應用通常使用黑色表面,以吸收激發(fā)信號,。有顏色的表面還可以防止相鄰孔之間的信號串擾,。
4. 表面處理
選擇哪種細胞表面處理,這要取決于你培養(yǎng)的是懸浮細胞還是貼壁細胞,。對于懸浮或球體細胞培養(yǎng),,建議使用BRAND inertGrade™微孔板,它經(jīng)過疏水凝膠處理,,可抑制細胞或蛋白附著,。對于輕松附著的貼壁細胞(如HeLa),標準的組織培養(yǎng)表面就足夠了,。對于那些貼壁有困難的細胞(如原代細胞),,或涉及到嚴格洗滌的應用,建議使用BRAND的cellGrade™微孔板,。這種*的表面與多聚賴氨酸處理的表面相似,,但它不是涂層,而是塑料性質(zhì)的物理變化,,因此不需要冷藏。對于那些敏感細胞或血清量減少的細胞,,建議使用cellGrade™ plus表面,。
最后,當然不能忽視培養(yǎng)容器的質(zhì)量,。這不僅僅指微孔板,,還包括與細胞接觸的一切,比如吸頭,,以避免細胞污染或死亡,。
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