裸鼠腫瘤模型

無胸腺裸鼠（Nude Mouse,，簡稱裸鼠）目前已成為醫(yī)學生物學研究領(lǐng)域中*的實驗動物模型，它是先天性胸腺缺陷的突變小鼠,，裸鼠接種成活的腫瘤對化療藥物的敏感性與臨床所見十分相近,。根據(jù)腫瘤細胞的特性和接種細胞的量,，一般皮下成瘤的周期為1-2個月。腫瘤大小測量一般為1周兩次,，游標卡尺測量腫瘤最長和最短部位,，腫瘤不宜生長過大，一般不要超過1000mm3,。

 裸鼠腫瘤模型實驗步驟

1,、細胞的狀態(tài)是成瘤實驗的關(guān)鍵，所以細胞生長狀態(tài)一定要好,，取處于對數(shù)生長期的細胞,，細胞達80-90%左右密度為宜。收集細胞前一天晚上更換新鮮培養(yǎng)基,。

2,、胰酶消化細胞后用預(yù)冷的PBS洗兩遍，目的為去除細胞中的血清,。

3,、用PBS或者無血清培養(yǎng)基吹打細胞沉淀至合適的濃度，一般皮下瘤接種的細胞量為1-5×10^6個細胞/支,，接種體積為0.1ml,，因此細胞懸液的濃度為1-5×10^7個細胞/ml。

4,、細胞消化后應(yīng)盡快接種到裸鼠皮下,，一般盡量在半小時內(nèi)完成，途中將細胞懸液放在冰上降低細胞的代謝,。

5,、選擇的裸鼠一般在5-8周齡，體重18-20g左右,，種植部位選擇血供豐富區(qū)域,，如腋窩中后部、腹股溝中上部,。

6,、接種前用槍將細胞懸液充分的吹散，防止細胞成團而降低細胞成活率,。

7,、接種時，針頭在皮下進針深一點,，約1cm深,，減少注射后細胞懸液從針眼溢出。

8,、如何抓牢裸鼠?左手拇指和食指捏緊裸鼠頸背部皮膚,，小拇指夾住裸鼠尾巴,。

9、接種后一周左右可以見到皮下開始出現(xiàn)腫塊,。

10,、根據(jù)腫瘤細胞的特性和接種細胞的量，一般皮下成瘤的周期為1-2個月,。腫瘤不宜生長過大,，一般不要超過1000mm3 ，腫瘤負荷過大常常會以違背動物倫理而被雜志社刁難(因為這個問題悲慘地被plos one拒過稿）,。

11,、腫瘤大小測量一般為1周兩次，游標卡尺測量腫瘤最長和最短部位,。V=1/2*a*b2 (a為長軸,，b為短軸)。

12,、皮下瘤取下后一部分凍液氮用作以后提蛋白和RNA,，一部分福爾馬林固定用做免疫組化、免疫熒光等,。