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SPE固相萃取儀操作步驟

來源:上海祗美電子科技有限公司   2021年11月23日 13:32  

吸附目標(biāo)化合物模式可以分為以下幾個(gè)步驟:

SPE柱預(yù)處理(棄去過柱液體)

樣品過SPE柱(棄去過柱液體)

SPE柱洗滌及干燥(棄去過柱液體)

目標(biāo)化合物洗脫(收集過柱液體)

2.2吸附雜質(zhì)模式

在固相萃取過程中,,當(dāng)樣品通過SPE柱時(shí),,SPE柱吸附樣品中的雜質(zhì),,而目標(biāo)化合物隨樣品基質(zhì)通過SPE柱,。我們稱之為“吸附雜質(zhì)模式”或“雜質(zhì)吸附模式”,,這種模式多用于樣品凈化,。在這種萃取模式中,,樣品過柱后的組分和柱洗滌的組分要一并收集。與目標(biāo)化合物吸附模式不同,,雜質(zhì)吸附模式中的柱洗滌是要將殘留在SPE柱上的目標(biāo)化合物洗脫下來,,而將雜質(zhì)保留在SPE柱上,。

 

在吸附雜質(zhì)模式中可以分為以下幾個(gè)步驟:

SPE柱預(yù)處理(棄去過柱液體)

樣品過SPE柱(收集過柱液體)

SPE柱洗滌(收集過柱液體至上述收集液體的試管中)

 

3.固相萃取中的主要作用力

3.1固相萃取中的非極性作用力

固相萃取中的非極性作用力產(chǎn)生于固相萃取材料功能團(tuán)上的碳?xì)滏I與樣品中化合物的碳?xì)滏I之間。這種作用力既為人們所熟悉的范德華引力或散射力,。由于有機(jī)分子或多或少都存在這種非極性結(jié)構(gòu),,非極性作用力常常被用于從樣品基質(zhì)中吸附分離具有非極性結(jié)構(gòu)的化合物。

使用zui多的非極性SPE柱是具由十八個(gè)碳組成的碳鏈官能團(tuán),,俗稱為C18柱。由于C18材料在液相色譜中廣泛使用,,所以人們對(duì)其性能也較為了解,,在SPE中也大量使用。一般說來,,非極性SPE柱通用性比較好,。所以比較適合用于同時(shí)萃取多種不同化學(xué)性質(zhì)的化合物。但其選擇性則比極性或離子交換作用力差,。

通常,,非極性SPE柱較適用于從極性基質(zhì)中萃取分離非極性及中等極性的目標(biāo)化合物。

對(duì)于通過非極性作用力吸附在非極性SPE柱上的目標(biāo)化合物,,可以用具有非極性性質(zhì)的溶劑洗脫,,如氯仿、環(huán)己烷等,。即便是極性較強(qiáng)的甲醇對(duì)于許多化合物來說也具有足夠的非極性作用力將其洗脫,。

3.2固相萃取中的極性作用力

固相萃取中的極性作用力在許多固相萃取材料官能團(tuán)及樣品中的化合物都可以發(fā)生。極性作用力包括: 氫鍵,、偶極力/偶極力,、誘導(dǎo)偶極力、π-π等,。如: 羥基,、氨基、巰基, 羰基,、芳香環(huán)及含氧,、氮、硫,、磷等雜原子的基團(tuán),。其中氫鍵是常見的極性作用力。

非極性的基質(zhì)環(huán)境有利于吸附劑和目標(biāo)化合物之間的極性作用力,;極性環(huán)境有利于破壞吸附劑和目標(biāo)化合物之間的極性作用力,;環(huán)境離子強(qiáng)度大也不利于吸附劑和分析物之間的極性作用力。

值得指出的是所有以鍵合硅膠為材料的SPE柱,,由于鍵合硅膠本身具有一定數(shù)量的沒有鍵合的 –OH基團(tuán)(沒有封尾),,所以都具有極性,。這種極性功能在非極性溶劑中比較明顯。

在極性萃取中常用的洗脫溶劑有:甲醇,、水,、THF、異丙醇,、乙酸,、乙腈、丙酮,、胺類,、高離子強(qiáng)度緩沖液或上述溶液的混合液。

3.3固相萃取中的離子作用力

離子作用力發(fā)生在帶相反電荷的樣品化合物與SPE填料官能團(tuán)之間,。對(duì)有機(jī)化合物而言,,能夠產(chǎn)生離子交換作用的化合物官能團(tuán)有兩類:

1.可生成陽離子的官能團(tuán)(帶正電荷)

2.可生成陰離子的官能團(tuán)(帶負(fù)電荷)

常見陽離子的官能團(tuán)包括:伯,仲,,叔,,丁胺類。

常見陰離子的官能團(tuán)包括:羰基,,磺酸基,,磷酸基等。

要正確使用離子交換柱進(jìn)行固相萃取,,必須注意控制萃取環(huán)境,。為了有效地利用離子交換機(jī)理將目標(biāo)化合物吸附在固相柱上,必須滿足以下兩個(gè)條件:

1. 環(huán)境的pH必需使分析物和吸附劑帶相反電荷

2. 環(huán)境不能含有高濃度帶有和分析物相同電荷的競爭化合物


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