超微量光度法的應(yīng)用：

定義: 超微量分光光度法是利用物質(zhì)所*的吸收光譜來鑒別物質(zhì)或測定其含量的分析檢測技術(shù)。

特點: 靈敏,、快速和簡便,，在復(fù)雜組分系統(tǒng)中，不需要分離,，即能檢測出其中所含的極少量物質(zhì),。

應(yīng)用: 生物化學(xué)研究中廣泛使用的方法之一，廣泛用于糖,，蛋白質(zhì),，核酸，酶等的快速定量檢測

超微量分光光度計的光譜范圍

包括波長范圍為380~780 nm的可見光區(qū)和波長范圍為200～380 nm的紫外光區(qū),。不同的光源都有其*的發(fā)射光譜,，因此可采用不同的發(fā)光體作為儀器的光源。

   鎢燈的發(fā)射光譜：鎢燈光源所發(fā)出的380～820nm波長的光譜,，光通過三棱鏡折射后,，可得到由紅、橙,、黃,、綠、藍,、靛,、紫組成的連續(xù)色譜,；該色譜可作為可見光分光光度計的光源。

   氘燈的發(fā)射光譜：氘燈能發(fā)出190～400 nm波長的光譜,，可作為紫外光光度計的光源,。  氙氣閃光燈的發(fā)射光譜：氙燈能發(fā)出200～850 nm波長的光譜，可作為紫外-可見光光度計的光源,。電源體積較小,，采用脈沖閃光方式工作，閃光次數(shù)可達109次,，壽命相對氘燈和鎢燈較長,。

物質(zhì)的吸收光譜

如果在光源和棱鏡之間放上某種物質(zhì)的溶液，此時在屏上所顯示的光譜已不再是光源的光譜,，它出現(xiàn)了幾條暗線,，即光源發(fā)射光譜中某些波長的光因溶液吸收而消失，這種被溶液吸收后的光譜稱為該溶液的吸收光譜,。

不同物質(zhì)的吸收光譜是不同的,。因此根據(jù)吸收光譜，可以鑒別溶液中所含的物質(zhì),。    

原理

當(dāng)光線通過某種物質(zhì)的溶液時,，透過的光的強度減弱。因為有一部分光在溶液的表面反射或分散,，一部分光被組成此溶液的物質(zhì)所吸收,，只有一部分光可透過溶液。

入射光 =  反射光 ＋ 分散光 ＋ 吸收光 ＋ 透過光

        如果我們用蒸餾水(或組成此溶液的溶劑)作為“空白”去校正反射,、分散等因素造成的入射光的損失,，則：

入射光 = 吸收光 十 透過光

 分光光度計進行樣品濃度測定的原理是根據(jù)朗伯-比爾（Lambert-Beer）定律,

A = ε b c

    其中,，A ——為物質(zhì)的吸光度,；

              ε——為物質(zhì)的吸光系數(shù)；

               b——為光路長度（光程）,；

               c——為物質(zhì)的濃度,。