高效液相色譜（HPLC）法是以高壓下的液體為流動相,，并采用顆粒極細的高效固定相的柱色譜分離技術(shù)。高效液相色譜儀系統(tǒng)主要由貯液瓶,、泵,、進樣器、柱子,、柱溫箱,、檢測器、數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)組成,。檢測器的作用是將柱流出物中樣品組成和含量的變化轉(zhuǎn)化為可供檢測的信號,。

高效液相色譜常用的檢測器有紫外檢測器、示差折光檢測器和熒光檢測器三種,。

1,、紫外檢測器

該檢測器適用于對紫外光（或可見光）有吸收性能樣品的檢測,。其特點是，使用面廣（如蛋白質(zhì),、核酸,、氨基酸、核苷酸,、多肽,、激素等均可使用）、靈敏度高（檢測下限為10-10g/ml）,、線性范圍寬,、對溫度和流速變化不敏感、可檢測梯度溶液洗脫的樣品,。

2,、示差折光檢測器

凡具有與流動相折光率不同的樣品組分，均可使用示差折光檢測器檢測,。目前,，糖類化合物的檢測大多使用此檢測系統(tǒng)。這一系統(tǒng)通用性強,、操作簡單,，但靈敏度低（檢測下限為10-7g/ml），流動相的變化會引起折光率的變化,，因此,，它既不適用于痕量分析，也不適用于梯度洗脫樣品的檢測,。

3,、熒光檢測器

凡具有熒光的物質(zhì)，在一定條件下,，其發(fā)射光的熒光強度與物質(zhì)的濃度成正比,。因此，這一檢測器只適用于具有熒光的有機化合物（如多環(huán)芳烴,、氨基酸,、胺類、維生素和某些蛋白質(zhì)等）的測定,，其靈敏度很高（檢測下限為10-12～10-14g/ml）,，痕量分析和梯度洗脫樣品的檢測均可采用。

 

HPLC常用的檢測器是紫外檢測器,。在日常使用過程中紫外檢測器主要需要注意檢測池和氘燈的使用與維護,。

1、檢測池：檢測池長時間使用可能會造成污染,，如果儀器的參比能量(REF ENERGY)正常,，測量能量(SMPENERGY)偏低,，可能為檢測池污染導(dǎo)致，可以對檢測池進行清洗,。

對檢測池零件的進行清洗,，一般先采用約1：4的硝酸溶液超聲清洗，分別用純水和甲醇溶液清洗,，然后重新組裝并將檢測池池體推進池腔內(nèi),，擰緊池板螺絲。注意組裝中,，池玻璃及墊片一定要放正,，以免壓碎池玻璃，造成檢測池泄漏,。

2,、氘燈：氘燈正常使用壽命可在1500小時以上。燈的使用壽命與檢測器的使用時間和開啟頻率有關(guān),，因此使用過程中應(yīng)盡量節(jié)省不必要的開機時間,，減少開關(guān)頻率，以延長氘燈的使用壽命,。

如果地判斷出氘燈已經(jīng)不能點亮或能量太低,，則需要更換新的氘燈。在購買氘燈時,，應(yīng)注意咨詢和核對氘燈的型號與儀器型號是否匹配,。更換到氘燈時，參照儀器說明書中的相關(guān)內(nèi)容,，特別要注意氘燈連接線的位置順序。