液相色譜因流動相引起的常見問題

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一些因流動相引起的常見問題

01

流動相脫氣不充分

流動相受熱,，或者流動相不同組分混合時會有氣體產(chǎn)生,，氣泡進入泵內(nèi)引起壓力波動,，增加噪音,，色譜圖上出現(xiàn)毛刺,?？稍囉孟铝蟹椒ń鉀Q問題：流動相再脫氣,；采用更有效的脫氣方法或兩種方法配合使用,；改系統(tǒng)內(nèi)混合為系統(tǒng)外預(yù)混合,。

流動相供給不暢

02

流動相用完，管道中吸入氣體引起泵壓力不穩(wěn),。應(yīng)經(jīng)常觀察儲液器中流動相的量,，加足流動相保證所有的樣品分析完畢。輸液管道上裝沉子沉至瓶底,，儲液器蓋上留一小孔正好夾住進液管,，使其不能上下移動,。

過濾器阻塞引起管道和泵腔空化，壓力不穩(wěn),。過濾器被微粒所阻塞或長霉,，去掉過濾器后如果系統(tǒng)運轉(zhuǎn)正常，說明已找出問題,，換上新的過濾器則可,。有時候換上新的過濾器仍然不暢，那就需要查查流動相的制備過程,，或者換大孔徑的過濾器,。不管如何，流動相都需要重新過濾,。

流速過高,、阻力大，造成空化現(xiàn)象,，這是由于過濾器孔徑,、管道內(nèi)徑、流速和溶劑黏度等引起的,。如果流速大于10mL/min,，常會出現(xiàn)這種現(xiàn)象。

使用下列方法解決：

（1）使用低流速,；

（2）換大孔徑的過濾器,；

（3）增加進液管道內(nèi)徑；

（4）抬高或加壓儲液器,；

（5）不用過濾器,，但流動相一定要先過濾；

（6）儲液器蓋子太緊,，在儲液器內(nèi)形成真空,，打出的流動相不連續(xù)。應(yīng)松開蓋子或留有1mm的縫隙,；

（7）進液管道阻塞或彎曲使泵抽不到液，注意調(diào)整進液管道或更換新的,。其它問題包括滲漏或接頭松動,、泵部件損壞等，都能引起供液不正常,。

03

流動相和儲液器被污染

由于污染,，噪音越來越大，檢測器基線上升,。污染物可能被泵以穩(wěn)定的濃度打入系統(tǒng),，而再以穩(wěn)定的濃度流出來,，所以在色譜圖中不出多余的峰。用梯度洗脫時弱流動相可以使污染物聚在柱頂,，流動相強度增加后污染物可能被洗脫出來一個大的偽峰,。有時基線噪音突然增大或突然提高，都是因為反復(fù)加進新的流動相或系統(tǒng)用得太久（通宵）所造成的,。新加進的流動相有污染物或者流動相長霉,，繁殖了細菌。

臟的儲液器會污染清潔的流動相,。每種流動相備有專用的儲液器,，或者定期報廢儲液器。

流動相污染來自這幾個方面

04

試劑質(zhì)量不高,，玻璃器皿不合格,；

微生物的影響；

配制流動相時操作不當(dāng)?shù)龋?/span>

因此要求高純度化學(xué)試劑和HPLC級溶劑,；

玻璃器皿按規(guī)定清洗干凈,；

為防止微生物生長，每天要用甲醇清洗系統(tǒng),；

懷疑系統(tǒng)內(nèi)生長了微生物,，可用稀硝酸沖洗即可（注意不要損壞柱和管道系統(tǒng)）；

真空脫氣時防止泵油帶入流動相,；

用清潔的惰性塞子,、攪棒、過濾器和玻璃器皿配制流動相,；

已經(jīng)污染的流動相一定要廢棄掉,。

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