經(jīng)驗(yàn)總結(jié)一：液質(zhì)使用經(jīng)驗(yàn)與禁忌

1、酸性物質(zhì)適合做負(fù)離子檢測(cè)，所以流動(dòng)相偏堿性較合適，促使其解離,，堿性物質(zhì)適合做正離子檢測(cè)，流動(dòng)相中適當(dāng)?shù)募尤胨?，促使其形成正離子，流動(dòng)相中適當(dāng)加一些醋酸鈉（或者醋酸銨）,，可形成加鈉的正離子或者加銨的正離子,。

2、糖苷類的物質(zhì)在做FAB和esi（＋）時(shí),，[M+Na]峰往往比[M+H]峰要強(qiáng),，此為經(jīng)驗(yàn)，原因只是推測(cè)可能和天然產(chǎn)物的提取過程有關(guān),；鹽類化合物如鹽酸鹽,、硫酸鹽在質(zhì)譜中酸的部分一般不會(huì)出現(xiàn),；二羧酸鹽（esi負(fù)離子模式）除了分子離子峰外，會(huì)出現(xiàn)連續(xù)掉44的兩個(gè)峰,，為失去羧酸根的離子,，這三個(gè)峰非常特征，但是會(huì)受錐孔電壓的影響,，調(diào)低電壓譜圖會(huì)更漂亮,。

3、胺類物質(zhì)做esi質(zhì)譜時(shí)要注意進(jìn)樣量要少,，因?yàn)楹苋菀纂x子化,，不易沖洗干凈，會(huì)影響后面樣品的測(cè)定,。像三乙胺在液質(zhì)聯(lián)用時(shí)不能用于調(diào)節(jié)流動(dòng)相pH值,。若不慎引入三乙胺，在正離子檢測(cè)時(shí)總會(huì)出現(xiàn)很強(qiáng)的102峰（三乙胺的[M+H]）.

4,、質(zhì)譜用水一般用純凈水之類的就很好,；質(zhì)譜用甲醇和乙腈，換用了很多品牌,，發(fā)現(xiàn)Merck的還是稍微好一些,；Finnigan用的氮?dú)獠灰欢ㄒ玫揭旱浚闷胀ǖ匿撈繗饩涂梢粤?，可能還省錢些,；建議大家買一個(gè)好一點(diǎn)的手電筒和一個(gè)放大鏡，手電筒用來看源里面,，放大鏡看你割的毛細(xì)管平整,。

5、質(zhì)譜的基線其實(shí)跟液相的紫外檢測(cè)器和熒光檢測(cè)器一樣,，基線高的原因不外乎內(nèi)部和外部的原因,。

1）你選擇的流動(dòng)相在質(zhì)譜的響應(yīng)比較高，比如水相比較多的時(shí)候,，噪音比較大些,；還有如果鹽含量比較大的時(shí)候，噪音更大些,。

2）檢測(cè)器的靈敏度越高的時(shí)候,，噪音應(yīng)該越高。如果質(zhì)譜的污染比較嚴(yán)重時(shí),，基線肯定比較高,。比如離子阱檢測(cè)器，用得久了，阱中的離子就會(huì)增多,，一方面降低了質(zhì)譜的靈敏度,，另一方面增加了基線噪音。

3）質(zhì)譜的基線很多時(shí)候還跟你選擇的離子寬度有關(guān),。比如你作選擇離子掃描的時(shí)候,，基線就低些。你作選擇反應(yīng)掃描的時(shí)候,，離子寬度不要選得太寬,，太寬噪音就高些。

4）多級(jí)質(zhì)譜一般做二級(jí)或三級(jí)質(zhì)譜,，基線噪音就低很多,。

6、質(zhì)譜維護(hù)經(jīng)驗(yàn)交流：做樣前－檢查氮?dú)?，流?dòng)相,，質(zhì)譜儀的真空度，毛細(xì)管溫度…

1）*好不用直接進(jìn)樣（容易污染離子源）,；

2）做聯(lián)用時(shí)*好分流（a可以使用常規(guī)柱,，b縮短分析時(shí)間，c 延長(zhǎng)質(zhì)量分析器壽命）,；

3）*好使用在線切換閥,，降前每個(gè)樣品的前后1－2分鐘的流動(dòng)相切入廢液（避免樣品中的鹽進(jìn)入質(zhì)譜，做Sequence時(shí)可以把平衡柱子的流動(dòng)相切入廢液）,；

4）開始聯(lián)用前,，直接運(yùn)行質(zhì)譜數(shù)分鐘，可以先將溫度（毛細(xì)管溫度和離子源溫度（APCI））加熱到預(yù)設(shè)定值（如果是APCI源還可以避免將燒掉heater,，太貴了,，*好別燒）；

5）待機(jī)時(shí)將切換閥置于waste,，避免剛開液相時(shí)將流動(dòng)相打入離子源,；

6）關(guān)機(jī)前毛細(xì)管的溫度先降下來，穩(wěn)定一段時(shí)間后再關(guān)閉電源,，避免風(fēng)扇停止轉(zhuǎn)動(dòng)后毛細(xì)管外圍的熱量向里擴(kuò)散,，容易引起內(nèi)部線路及電子元器件老化加速；

7）每天清理毛細(xì)管口外部,，擦洗干凈,，每次停機(jī)時(shí)注意清洗Skimmer，用無(wú)塵擦拭紙,，kimberly那種,；

8）如果用的是鋼瓶而且天天做樣的話，將兩個(gè)鋼瓶并聯(lián),，當(dāng)然,，一月不做一次的話就算了；

9）做定量時(shí)注意離子源噴針的具體位置,，否則標(biāo)準(zhǔn)曲線就不能用了,；

10）不要不經(jīng)過柱子分離進(jìn)行定量分析，結(jié)果不可靠（競(jìng)爭(zhēng)性抑制目標(biāo)分子離子化）,；

11）如果是負(fù)離子檢測(cè)的話,，可以相流動(dòng)相中加入少量異丙醇；

12）不要使用不揮發(fā)性鹽,，如果使用揮發(fā)性鹽,，但濃度不要超過20mmol/l；

13）需要使用酸的情況下可以用甲酸,，乙酸可以用,，但能用甲酸或乙酸時(shí)就別用TFA；

7,、理論上液質(zhì)聯(lián)用禁止使用任何不揮發(fā)性的緩沖鹽,，如果需要盡量使用諸如乙酸氨等揮發(fā)性鹽，濃度不要超過20mmol/l.

對(duì)于不揮發(fā)性的緩沖鹽,，如果你的儀器有吹掃捕集的話也可使用,，但一定要小心。萬(wàn)不得已也不要用,，首先有不揮發(fā)鹽是得不到好的離子流的,，其次鹽留在質(zhì)譜中很難除掉，除非停機(jī)清洗,，不然一直會(huì)影響其他樣品的分析,。

可以找質(zhì)譜友好的條件來做液質(zhì)聯(lián)機(jī)，例如色譜條件為20mM磷酸鹽的水/乙腈流動(dòng)相,，做液質(zhì)聯(lián)機(jī)的時(shí)候就可以用醋酸銨代替,，然后用醋酸調(diào)節(jié)pH值與磷酸鹽的一致即可。

除了難揮發(fā)的鹽,，三乙胺,、表面活性劑、還有高濃度（>0.5%）的TFA,，都對(duì)質(zhì)譜不好,，液質(zhì)聯(lián)用的流動(dòng)相中應(yīng)該避免。

經(jīng)驗(yàn)總結(jié)二：質(zhì)量定量分析經(jīng)驗(yàn)

1,、要用目標(biāo)離子的碎片定量,，特征性強(qiáng),，排除干擾；

2,、在定量分析的方法設(shè)置上,，盡可能提高掃描速率，提高準(zhǔn)確率和重復(fù)性（可以通過a減小掃描質(zhì)量數(shù)的范圍來提高目標(biāo)峰的掃描次數(shù),，或 將一個(gè)樣品全部分析時(shí)間斷分成n個(gè)segments,，對(duì)目標(biāo)離子單獨(dú)設(shè)置掃描模式）；

3,、一定要通過色譜柱分離后定量分析,，避免競(jìng)爭(zhēng)性離子的存在影響目標(biāo)離子的離子化效率；如果目標(biāo)分子未與競(jìng)爭(zhēng)性分子*分開,，則在離子化過程中導(dǎo)致目標(biāo)分子的離子化效率降低,，導(dǎo)致樣品分子的定量結(jié)果偏低，當(dāng)然標(biāo)準(zhǔn)濃度的樣品也要用相同的方法分析,。

4,、如果樣品都是純品的話可以不經(jīng)過色譜柱直接進(jìn)樣分析，包括做標(biāo)準(zhǔn)曲線的樣品（雖然不建議直接進(jìn)樣分析）,。

5,、如果用的離子源的噴針位置是可移的話，一定要記住做標(biāo)準(zhǔn)曲線時(shí)其位置,，否則其位置移動(dòng)后在相同的條件下進(jìn)入質(zhì)譜的離子流量會(huì)發(fā)生改變,，標(biāo)準(zhǔn)曲線就不能使用了！對(duì)于調(diào)用的質(zhì)譜方法不要改動(dòng)shealth gas and aux gas 的流速,，否則會(huì)影響進(jìn)入質(zhì)譜的樣品量,。

6、所建立的標(biāo)準(zhǔn)曲線一個(gè)月后如果想重復(fù)使用,，則用QC樣品檢驗(yàn)一下該標(biāo)準(zhǔn)曲線,！

7、對(duì)于已經(jīng)建立好的分析方法在掃描范圍,、流動(dòng)相的組成,、梯度或流速等方面不要作任何改動(dòng)，否則,，標(biāo)準(zhǔn)曲線要重作,。掃描范圍改變目標(biāo)峰的掃描次數(shù)、流動(dòng)相組成改變離子化效率,，流速改變色譜峰的保留時(shí)間和峰寬,。

8、離子阱的強(qiáng)項(xiàng)在于多級(jí)－定性,，四級(jí)桿的強(qiáng)項(xiàng)在于定量,；

9,、對(duì)于熱穩(wěn)定性不好的樣品可以通過提高氣速，降低毛細(xì)管溫度的方法保證定量分析的重復(fù)性,；一旦方法固定后不要輕易改動(dòng),。

經(jīng)驗(yàn)總結(jié)三：解析圖譜

解析未知樣的質(zhì)譜圖，大致按以下程序進(jìn)行,。

（一）解析分子離子區(qū)

(1) 標(biāo)出各峰的質(zhì)荷比數(shù)，尤其注意高質(zhì)荷比區(qū)的峰,。

(2) 識(shí)別分子離子峰,。首先在高質(zhì)荷比區(qū)假定分子離子峰，判斷該假定分子離子峰與相鄰碎片離子峰關(guān)系是否合理,，然后判斷其是否符合氮律,。若二者均相符，可認(rèn)為是分子離子峰,。

(3) 分析同位素峰簇的相對(duì)強(qiáng)度比及峰與峰間的Dm值,，判斷化合物是否含有Cl、Br,、S,、Si等元素及F、P,、I等無(wú)同位素的元素,。

(4) 推導(dǎo)分子式，計(jì)算不飽和度,。由高分辨質(zhì)譜儀測(cè)得的精確分子量或由同位素峰簇的相對(duì)強(qiáng)度計(jì)算分子式,。若二者均難以實(shí)現(xiàn)時(shí)，則由分子離子峰丟失的碎片及主要碎片離子推導(dǎo),，或與其它方法配合,。

(5) 由分子離子峰的相對(duì)強(qiáng)度了解分子結(jié)構(gòu)的信息。分子離子峰的相對(duì)強(qiáng)度由分子的結(jié)構(gòu)所決定,，結(jié)構(gòu)穩(wěn)定性大,，相對(duì)強(qiáng)度就大。對(duì)于分子量約200的化合物,，若分子離子峰為基峰或強(qiáng)蜂,，譜圖中碎片離子較少、表明該化合物是高穩(wěn)定性分子,，可能為芳烴或稠環(huán)化合物,。

例如：萘分子離子峰m／z 128為基峰，蒽醌分子離子峰m／z 208也是基峰,。

分子離子峰弱或不出現(xiàn),，化合物可能為多支鏈烴類,、醇類、酸類等,。

（二）解析碎片離子

(1) 由特征離子峰及丟失的中性碎片了解可能的結(jié)構(gòu)信息,。

若質(zhì)譜圖中出現(xiàn)系列CnH2n+1峰，則化合物可能含長(zhǎng)鏈烷基,。若出現(xiàn)或部分出現(xiàn)m／z 77,，66，65,，51,，40，39等弱的碎片離子蜂,，表明化合物含有苯基,。若m／z 91或105為基峰或強(qiáng)峰，表明化合物含有芐基或苯甲?；?。若質(zhì)譜圖中基峰或強(qiáng)峰出現(xiàn)在質(zhì)荷比的中部，而其它碎片離子峰少,，則化合物可能由兩部分結(jié)構(gòu)較穩(wěn)定,，其間由容易斷裂的弱鍵相連。

(2) 綜合分析以上得到的全部信息,，結(jié)合分子式及不飽和度,，提出化合物的可能結(jié)構(gòu)。

(3) 分析所推導(dǎo)的可能結(jié)構(gòu)的裂解機(jī)理,，看其是否與質(zhì)譜圖相符,，確定其結(jié)構(gòu)，并進(jìn)一步解釋質(zhì)譜,，或與標(biāo)準(zhǔn)譜圖比較,，或與其它譜(1H NMR、13C NMR,、IR)配合,，確證結(jié)構(gòu)。