那么下面上海金鵬分析儀器有限公司為大家簡(jiǎn)單介紹一下關(guān)于蛋白質(zhì)的雙向電泳注意事項(xiàng):
    蛋白質(zhì)的雙向電泳的**向?yàn)榈入娋劢梗?/span>Isoelectrofocusing, IEF）,根據(jù)蛋白質(zhì)的等電點(diǎn)不同進(jìn)行分離,；二向?yàn)镾DS-聚丙烯酰胺凝膠電泳（SDS-PAGE）,，按亞基分子量大小進(jìn)行分離,。經(jīng)過電荷和分子量?jī)纱畏蛛x后,，可以得到蛋白質(zhì)分子的等電點(diǎn)和分子量信息,。
注意事項(xiàng)：
1. 一向聚焦與二向電泳之間需要平衡,，時(shí)間視蛋白質(zhì)的性質(zhì)而定，一般為10min,，*多不超過15min,。
2. 過量的上樣量會(huì)引起雙向圖形畸形，特別在一向聚焦時(shí),，當(dāng)樣品濃度超過5mg時(shí),，則蛋白質(zhì)凝聚和沉淀，使二向時(shí)產(chǎn)生水平和垂直條紋,。
3. 含尿素的試劑均應(yīng)避免過高的溫度處理,，一般不要超過30℃，否則尿素分解產(chǎn)生異硫氰酸鹽會(huì)引起羧基甲?；鴮?dǎo)致電荷不均一性,。
4. **向中過量的去污劑會(huì)嚴(yán)重影響雙向電泳圖譜，因此聚焦完畢進(jìn)行平衡前,，用雙蒸餾水沖洗膠條,，以除去殘留的去污劑,。
5. 雙向電泳中雙向凝膠間的界面緊密接觸非常重要，如果接觸不好或者兩者之間留有氣泡,，則導(dǎo)致轉(zhuǎn)移時(shí)分子擴(kuò)散,。
6. 雙向電泳中的條紋現(xiàn)象是常見的問題。水平條紋可能與一向電泳時(shí)間不夠,，聚焦不好有關(guān),，或者在加樣處產(chǎn)生沉淀和引起重新溶解所致；縱向條紋則表明樣品沒*溶解,，這可以通過調(diào)整樣品量,，增加電泳時(shí)間，改善樣品的溶解狀態(tài),，同時(shí)在加樣前通過高速離心以除掉所有不溶物,。
 
以上就是上海金鵬分析儀器有限公司為大家整理總結(jié)關(guān)于蛋白質(zhì)的雙向電泳注意事項(xiàng)。
 
我們上海金鵬分析儀器有限公司是專業(yè)生產(chǎn)超微量核酸蛋白測(cè)定儀,、化學(xué)發(fā)光成像系統(tǒng),、凝膠成像分析系統(tǒng)、紫外分析儀,、核酸蛋白檢測(cè)儀,、紫外檢測(cè)儀、蛋白質(zhì)分離純化系統(tǒng),、光化學(xué)反應(yīng)儀,、旋渦混合器、恒流泵,、自動(dòng)部分收集器等十幾個(gè)系列產(chǎn)品的廠家,，歡迎大家前來訂購(gòu)