脂肪檢測方法可用索式提取法（經(jīng)典方法）

原理

樣品經(jīng)前處理后,，放入圓筒濾紙內(nèi),，將濾紙筒置于索式提取管中,，利用YM或石油醚在水浴中加熱回流，使樣品中的脂肪進(jìn)入溶劑中,，回收溶劑后所得到的殘留物,，即為脂肪（粗脂肪）。

采用這種方法測出游離態(tài)脂,，此外還含有磷脂,、色素、蠟狀物,、揮發(fā)油,、糖脂等物質(zhì)，所以用索氏提取法測得的脂肪為粗脂肪,。

適用范圍與特點(diǎn)

索氏提取法適用于脂類含量較高,，結(jié)合態(tài)的脂類含量較少，能烘干磨細(xì),，不宜吸濕結(jié)塊的樣品的測定,。此法只能測定游離態(tài)脂肪,，而結(jié)合態(tài)脂肪無法測出,，要想測出結(jié)合態(tài)脂肪需在一定條件下水解后變成為游離態(tài)的脂肪方能測出。

另外此法是經(jīng)典方法,，對(duì)大多數(shù)樣品結(jié)果比較可靠,，但需要周期長，溶劑量大,。

濾紙筒的制備

將濾紙剪成長方形8×375px ,，卷成圓筒，直徑為150px,，將圓筒底部封好,，最好放一些脫脂棉，避免向外漏樣,。

稱取樣品

將樣品烘干磨細(xì),，稱取一定量與紙筒封好上口，最好用測定水的樣品。

索式提取器的準(zhǔn)備

索氏提取器由三部分組成,，回流冷凝管,、提取管、提脂瓶組成,。提脂瓶在使用前需烘干并稱至恒重,。其它要干燥。

抽提

將裝好樣的紙筒放入抽提管 ,， 倒入YM,，YM的量從提取管加入，加入的量為提取瓶體積的2/3 接上冷凝裝置,，在恒溫水浴中抽提,，水浴溫度大約為55℃左右，可用濾紙檢驗(yàn),，理論值抽提6-8小時(shí),，實(shí)際值3-4小時(shí)，但也根據(jù)樣品性質(zhì)來決定,。

回收YM

當(dāng)YM在提取管內(nèi)即將虹吸時(shí)立即取下提取管,，將其下口放到Y(jié)M回收瓶內(nèi)，使之傾斜,，然后將提取瓶放到100-150℃烘箱烘至恒重,。

計(jì)算

脂肪%= (W2-W1)/W x 100

W2——瓶和樣品重（g）

W1——瓶子重量（g）

W——樣品重量（g）

或：脂肪%=（抽提后濾紙與樣品重量—抽提前濾紙重量）/樣品重量 × 100

濾紙筒應(yīng)事先放入燒杯與100-105℃烘箱烘至恒重。

索式提取法注意事項(xiàng)

（1）樣品應(yīng)干燥后研細(xì),，裝樣品的濾紙筒一定要緊密,，不能往外漏樣品，否則重做,。

（2）放入濾紙筒的高度不能超過回流彎管,，否則YM不易穿透樣品，使脂肪不能全部提出,，造成誤差,。

（3） 碰到含多糖及糊精的樣品要先以冷水處理，等其干燥后連同濾紙一起放入提取器內(nèi),。

（4） 提取時(shí)水浴溫度不能過高,，一般使YM剛開始沸騰即可（約45℃左右），回流速度以8-12次/時(shí)為宜,。

（5） 所用YM必需是無水YM,，如含有水分則可能將樣品中的糖以及無機(jī)物抽出，造成誤差,。

（6） 若用干樣品測定脂肪,，可按下式計(jì)算原來樣品脂肪的含量

脂肪（%）= （W1-W2）(100-A) / W

A— 100克樣品中水分的含量（g）

(7) 冷凝管上端最好連接一個(gè)氯化鈣干燥管,，這樣不僅可以防止空氣中水分進(jìn)入，而且還可以避免YM揮發(fā)在空氣中,。這樣可防止實(shí)驗(yàn)室微小環(huán)境空氣的污染,，如無此裝置，塞一團(tuán)干脫脂棉球亦可,。

（8）如果沒有無水YM可以自己制備,，制備方法如下：在100mlYM中，加入無水石膏50克,，振搖數(shù)次,，靜止10小時(shí)以上，蒸餾,，收集35℃以下的蒸餾液,，即可應(yīng)用。

（9）將提取瓶放在烘箱內(nèi)干燥時(shí),，瓶口向一側(cè)傾斜45度防止揮發(fā)物YM易與空氣形成對(duì)流,，這樣干燥迅速。

（10）如果沒有YM或無水乙醇時(shí),，可以用石油醚提取,，石油醚沸點(diǎn)30-60℃為好。

（11）使用揮發(fā)YM或石油醚時(shí),，切忌直接用火源加熱,，應(yīng)用電熱套、電水浴,、電燈泡等,。

（12） 這里恒重的概念有區(qū)別，它表示最初達(dá)到的重量,，即溶劑和水分*揮發(fā)時(shí)的恒重,，此后若在繼續(xù)加熱，則因油脂氧化等原因會(huì)導(dǎo)致重量增加,。

（13） 在干燥器中的冷卻時(shí)間一般要一致,。