細(xì)胞焦亡是一種炎癥形式的、程序性細(xì)胞死亡,，其特征是細(xì)胞不斷脹大直至細(xì)胞膜破裂,，釋放促炎性細(xì)胞因子 IL-1β 和 IL-18 等內(nèi)容物進(jìn)而引發(fā)強(qiáng)烈的炎癥反應(yīng)^[1,10]，這是一種不同于細(xì)胞凋亡和細(xì)胞壞死的過(guò)程（表 1）,。

根據(jù)參考文獻(xiàn) 2,3,10 總結(jié)

已發(fā)現(xiàn)焦亡與多種疾病相關(guān),，包括微生物感染^[10],、動(dòng)脈粥樣硬化及其他心血管疾病^[6]、敗血癥^[4] 和肝病^[10] 等,，焦亡及其分子機(jī)制可以作為潛在的新型治療靶點(diǎn)^[9],。近來(lái)的研究發(fā)現(xiàn)，在腫瘤中引發(fā)細(xì)胞焦亡可有效調(diào)節(jié)腫瘤微環(huán)境,，進(jìn)而激活很強(qiáng)的 T 細(xì)胞誘導(dǎo)的抗腫瘤免疫活性,，清除腫瘤，提示細(xì)胞焦亡未來(lái)將會(huì)對(duì)腫瘤免疫治療發(fā)揮推動(dòng)性作用^[14,15],。

焦亡的經(jīng)典形式是 caspase-1 依賴性的，同時(shí),，也有多項(xiàng)研究確定了 caspase-1 非依賴性的非經(jīng)典途徑,。

在細(xì)菌、病毒和宿主細(xì)胞成分的 PAMPs 和 DAMPs 刺激下,，細(xì)胞內(nèi)的模式識(shí)別受體 NLRs 家族（Nucleotide-binding oligomerization domain and leucine-rich repeat receptors）包括 NLRP3,、NLRP1b 和 NLRC4/CARD12 激活 Caspase 1。NLR-Caspase 1 激活后，形成炎癥小體,。炎癥小體是由傳感器 NLRs,、蛋白酶 Caspases 效應(yīng)器和稱為 ASC 的銜接蛋白組成的多蛋白結(jié)構(gòu)（表 2）^[8,9,10]。

* 炎癥小體組裝不需要,，但可能發(fā)揮作用,，根據(jù)參考文獻(xiàn) 1,8,9 總結(jié)

除了形成炎癥小體外，炎癥性 Caspases-1,、-4/5（人）和-11（小鼠）還切割激活 Gasdermin D,，切割產(chǎn)生的 Gasdermin D 的 N 端片段多聚化，在質(zhì)膜上形成孔隙,，釋放促炎性細(xì)胞因子^[7,10],。主動(dòng)釋放促炎性細(xì)胞因子，是焦亡相較于其他形式細(xì)胞死亡的*特征,。促炎細(xì)胞因子 IL-1β 和 IL-18 首先翻譯成非活性形式,，然后被 Caspase-1 裂解并激活^[3,7,10]，之后這些細(xì)胞因子可以通過(guò) Gasdermin D 形成的孔釋放,。

細(xì)胞焦亡流程示意圖^[3]

Gasdermin D 也可以 Caspase-1 非依賴性形式被 Caspase-4,、-5 和-11 激活。然而在這種情況下,，促炎性 IL-1β 和 IL-18 的激活仍然依賴于 Caspase-1 的活性^[10],。Caspase-3 也被證明能激活 Gasdermin E，同樣在細(xì)胞膜上形成孔隙,，釋放 DAMP 和細(xì)胞因子^[3],。

檢測(cè)焦亡有多種方法,，主要有以下幾種,，必要時(shí)可以結(jié)合多種指標(biāo)進(jìn)行評(píng)估。

• 基于酶活性比色法檢測(cè)乳酸脫氫酶（LDH,，質(zhì)膜孔隙形成的標(biāo)志）的釋放,。

• 用電子顯微鏡在單個(gè)細(xì)胞基礎(chǔ)上評(píng)估膜完整性，觀察是否有細(xì)胞腫脹和胞漿釋放,。該方法的缺點(diǎn)是,，焦亡和壞死都涉及到細(xì)胞內(nèi)容物的釋放，僅從形態(tài)學(xué)特征很難區(qū)分,。

• 通過(guò)標(biāo)志物組合來(lái)確定：包括 Gasdermin D 和 E 的裂解,，可以用 WB 來(lái)驗(yàn)證；IL-1β 和 IL-18 的激活和釋放,，可用 ELISA 檢測(cè)細(xì)胞上清來(lái)進(jìn)行定量,；Caspases（caspase-1,、-3、-4,、-5 和-11）的激活^[12,13],。

Bio-Techne 旗下子品牌 R&D Systems® 和 Novus Biologicals® 可提供細(xì)胞焦亡研究相關(guān)的抗體、ELISA 試劑盒及活性分析試劑盒等工具,，文中涉及到的關(guān)鍵指標(biāo)的代表產(chǎn)品如下：