色譜定量方法
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面積歸一法,、內(nèi)標(biāo)法,、外標(biāo)法、標(biāo)準(zhǔn)加入法,。這么多定量法,，用哪一種呢,？每一種的適用范圍是什么呢？其優(yōu)缺點(diǎn)又是什么,？其標(biāo)準(zhǔn)物又有什么要求呢,？看完你就都知道了。

歸一化法

把所有出峰的組分含量之和按100%計(jì)的定量方法,，稱(chēng)為歸一化法,。

各成分校正因子一致時(shí)可用該法，該法簡(jiǎn)便,、準(zhǔn)確,，特別是進(jìn)樣量不容易準(zhǔn)確控制時(shí)，進(jìn)樣濃度及進(jìn)樣量的變化的影響很小,。

其他操作條件,，如流速、柱溫等變化對(duì)定量結(jié)果的影響也很小,。GC應(yīng)用廣于HPLC,。

外標(biāo)法（標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)法、直接比較法）

首先用欲測(cè)組分的標(biāo)準(zhǔn)樣品繪制標(biāo)準(zhǔn)工作曲線(xiàn),。具體作法是：用標(biāo)準(zhǔn)樣品配制成不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)系列,，在與欲測(cè)組分相同的色譜條件下，等體積準(zhǔn)確量進(jìn)樣,，測(cè)量各峰的峰面積或峰高,，用峰面積或峰高對(duì)樣品濃度繪制標(biāo)準(zhǔn)工作曲線(xiàn)，此標(biāo)準(zhǔn)工作曲線(xiàn)應(yīng)是通過(guò)原點(diǎn)的直線(xiàn),。若標(biāo)準(zhǔn)工作曲線(xiàn)不通過(guò)原點(diǎn),，說(shuō)明測(cè)定方法存在系統(tǒng)誤差。標(biāo)準(zhǔn)工作曲線(xiàn)的斜率即為絕對(duì)校正因子。

當(dāng)欲測(cè)組分含量變化不大,，并已知這一組分的大概含量時(shí),，也可以不必繪制標(biāo)準(zhǔn)工作曲線(xiàn)，而用單點(diǎn)校正法,，即直接比較法定量,。單點(diǎn)校正法實(shí)際上是利用原點(diǎn)作為標(biāo)準(zhǔn)工作曲線(xiàn)上的另一個(gè)點(diǎn)。因此,，當(dāng)方法存在系統(tǒng)誤差時(shí)（即標(biāo)準(zhǔn)工作曲線(xiàn)不通過(guò)原點(diǎn)）,，單點(diǎn)校正法的誤差較大。因此規(guī)定,，y=ax+b ,。b的絕對(duì)值應(yīng)不大于100%響應(yīng)值是y的2%。

標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)法的優(yōu)點(diǎn)：繪制好標(biāo)準(zhǔn)工作曲線(xiàn)后測(cè)定工作就很簡(jiǎn)單了,，計(jì)算時(shí)可直接從標(biāo)準(zhǔn)工作曲線(xiàn)上讀出含量,，這對(duì)大量樣品分析十分合適。特別是標(biāo)準(zhǔn)工作曲線(xiàn)繪制后可以使用一段時(shí)間,，在此段時(shí)間內(nèi)可經(jīng)常用一個(gè)標(biāo)準(zhǔn)樣品對(duì)標(biāo)準(zhǔn)工作曲線(xiàn)進(jìn)行單點(diǎn)校正,，以確定該標(biāo)準(zhǔn)工作曲線(xiàn)是否還可使用。

標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)法的缺點(diǎn)：每次樣品分析的色譜條件（檢測(cè)器的響應(yīng)性能,，柱溫度,，流動(dòng)相流速及組成，進(jìn)樣量,，柱效等）很難*相同,，因此容易出現(xiàn)較大誤差。另外,，標(biāo)準(zhǔn)工作曲線(xiàn)繪制時(shí),，一般使用欲測(cè)組分的標(biāo)準(zhǔn)樣品（或已知準(zhǔn)確含量的樣品），因此對(duì)樣品前處理過(guò)程中欲測(cè)組分的變化無(wú)法進(jìn)行補(bǔ)償,。

內(nèi)標(biāo)法

選擇適宜的物質(zhì)作為欲測(cè)組分的參比物,，定量加到樣品中去，依據(jù)欲測(cè)組分和參比物在檢測(cè)器上的響應(yīng)值（峰面積或峰高）之比和參比物加入的量進(jìn)行定量分析的方法稱(chēng)為內(nèi)標(biāo)法,。

內(nèi)標(biāo)法的關(guān)鍵是選擇合適的內(nèi)標(biāo)物,。內(nèi)標(biāo)物應(yīng)是原樣品中不存在的純物質(zhì)，該物質(zhì)的性質(zhì)應(yīng)盡可能與欲測(cè)組分相近,，不與被測(cè)樣品起化學(xué)反應(yīng),，同時(shí)要能*溶于被測(cè)樣品中。內(nèi)標(biāo)物的峰應(yīng)盡可能接近欲測(cè)組分的峰,，或位于幾個(gè)欲測(cè)組分的峰中間,，但必須與樣品中的所有峰不重疊,，即*分開(kāi)。一般會(huì)選擇標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的同位素物質(zhì)作為內(nèi)標(biāo)物,。

內(nèi)標(biāo)法的優(yōu)點(diǎn)：進(jìn)樣量的變化,，色譜條件的微小變化對(duì)內(nèi)標(biāo)法定量結(jié)果的影響不大，特別是在樣品前處理（如濃縮,、萃取,，衍生化等）前加入內(nèi)標(biāo)物，然后再進(jìn)行前處理時(shí),，可部分補(bǔ)償欲測(cè)組分在樣品前處理時(shí)的損失,。若要獲得很高精度的結(jié)果時(shí)，可以加入數(shù)種內(nèi)標(biāo)物,，以提高定量分析的精度,。

內(nèi)標(biāo)法的缺點(diǎn)：選擇合適的內(nèi)標(biāo)物比較困難,，內(nèi)標(biāo)物的稱(chēng)量要準(zhǔn)確,，操作較麻煩。使用內(nèi)標(biāo)法定量時(shí)要測(cè)量欲測(cè)組分和內(nèi)標(biāo)物的兩個(gè)峰的峰面積（或峰高）,，根據(jù)誤差疊加原理,，內(nèi)標(biāo)法定量的誤差中，由于峰面積測(cè)量引起的誤差是標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)法定量的2-2,，但是由于進(jìn)樣量的變化和色譜條件變化引起的誤差,，內(nèi)標(biāo)法比標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)法要小很多，所以總的來(lái)說(shuō),，內(nèi)標(biāo)法定量比標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)法定量的準(zhǔn)確度和精密度都要好,。

標(biāo)準(zhǔn)加入法

標(biāo)準(zhǔn)加入法實(shí)質(zhì)上是一種特殊的內(nèi)標(biāo)法，是在選擇不到合適的內(nèi)標(biāo)物時(shí),，以欲測(cè)組分的純物質(zhì)為內(nèi)標(biāo)物,，加入到待測(cè)樣品中，然后在相同的色譜條件下,，測(cè)定加入欲測(cè)組分純物質(zhì)前后欲測(cè)組分的峰面積（或峰高）,，從而計(jì)算欲測(cè)組分在樣品中的含量的方法。

標(biāo)準(zhǔn)加入法的優(yōu)點(diǎn)：不需要另外的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)作內(nèi)標(biāo)物,，只需欲測(cè)組分的純物質(zhì),，進(jìn)樣量不必十分準(zhǔn)確，操作簡(jiǎn)單,。若在樣品的前處理之前就加入已知準(zhǔn)確量的欲測(cè)組分,，則可以*補(bǔ)償欲測(cè)組分在前處理過(guò)程中的損失，是色譜分析中較常用的定量分析方法,。

標(biāo)準(zhǔn)加入法的缺點(diǎn)：要求加入欲測(cè)組分前后兩次色譜測(cè)定的色譜條件*相同,，以保證兩次測(cè)定時(shí)的校正因子*相等，否則將引起分析測(cè)定的誤差。

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