HPLC常見異常峰型

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液相色譜儀HPLC分析過程中,，由于各種原因，經(jīng)常會(huì)出現(xiàn)一些異常峰形,，嚴(yán)重影響對結(jié)果的分析,，給實(shí)驗(yàn)人員帶來很大的困擾,。下面潤揚(yáng)儀器色譜小科介紹一些常見的峰形以及可能的原因：

1. 未出峰    可能的原因：

a. 未成功進(jìn)樣，或樣品未溶解進(jìn)溶劑中,，或樣品分解變質(zhì)或樣品濃度太低,；

b. 液相色譜儀器本身的問題：泵或者檢測器故障；

c. 流動(dòng)相選擇不合適,，如對于反相硅膠柱來說,，若流動(dòng)相極性太大，是沖不下來一些小極性的物質(zhì)的,，物質(zhì)一直保留在柱子中,因而不出峰,；

d. 檢測器不合適，如有些產(chǎn)品沒有紫外吸收或者吸收很弱,，但是檢測還使用了UV檢測器,；

2.平頭峰     可能的原因：

a. 樣品濃度過大或進(jìn)樣體積太大，這個(gè)也是大多數(shù)原因,；

b. 液相色譜儀檢測器設(shè)置不正確,；

3.負(fù)峰     可能的原因：

a. 流動(dòng)相吸收本底值過高；

b. 進(jìn)樣過程中進(jìn)入空氣,；

c. 樣品組分的吸收低于流動(dòng)相,；

d. 配制樣品的溶劑與流動(dòng)相不一致；

4.肩峰     可能的原因:

a. 進(jìn)樣量過大,，樣品濃度過高,；

b. 保護(hù)柱或色譜柱柱頭堵塞；

c. 保護(hù)拄或色譜柱污染或失效,；

d. 色譜柱柱頭塌陷,；

5.裂峰     可能的原因：

a. 溶劑效應(yīng)：溶解樣品用的溶劑和起始流動(dòng)相極性相差太大；

b. 保護(hù)柱或色譜柱柱頭堵塞,；

c. 保護(hù)拄或色譜柱污染或失效,；

d. 色譜柱柱頭塌陷；

6.鬼峰     可能的原因：

鬼峰（ghost peak）是在某個(gè)譜圖里出現(xiàn),，可能同樣的條件再做一次又不出現(xiàn)了,，時(shí)有時(shí)無的峰。

a. 進(jìn)樣閥殘余峰,，在每次進(jìn)完樣后用充足的時(shí)間來平衡和清洗系統(tǒng),；

b. 樣品中存在未知物，改進(jìn)樣品的預(yù)處理,；

c. 流動(dòng)相污染,，更換新流動(dòng)相（或者換品牌）；盡可能現(xiàn)配現(xiàn)用,隔夜的流動(dòng)相再次使用時(shí)要過濾,；

d. 流路中有小的氣泡,，打開Purge閥,，加大流速排除；

7. 前伸峰     可能的原因：

a. 進(jìn)樣量或樣品濃度高,；

b. 溶解樣品的溶劑比流動(dòng)相極性強(qiáng),；

c. 保護(hù)拄或色譜柱污染或失效；

d. 流動(dòng)相不合適,，更換新流動(dòng)相（調(diào)pH或換種類、比例等）,；

8. 拖尾峰     可能的原因：

a. 進(jìn)樣量或樣品濃度高,；

b. 流動(dòng)相不合適，更換新流動(dòng)相（調(diào)pH或換種類,、比例等）,；

c. 硅羥基作用：加入三乙胺，用堿致鈍化柱增加緩沖液或鹽的濃度降低流動(dòng)相pH值,，鈍化樣品,；

d. 柱內(nèi)燒結(jié)不銹鋼失效：更換燒結(jié)不銹鋼，加在線過濾器,過濾樣品,；

e. 色譜柱柱頭塌陷或柱效下降：更換色譜柱,；

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