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超微量光度法的定義與應(yīng)用

來源:上海金鵬分析儀器有限公司   2021年07月13日 13:55  

那么下面上海金鵬分析儀器有限公司為大家簡單介紹一下關(guān)于超微量光度法的定義與應(yīng)用:

定義: 超微量分光光度法是利用物質(zhì)所*的吸收光譜來鑒別物質(zhì)或測定其含量的分析檢測技術(shù),。

特點: 靈敏,、快速和簡便,在復(fù)雜組分系統(tǒng)中,,不需要分離,即能檢測出其中所含的極少量物質(zhì),。

應(yīng)用: 生物化學(xué)研究中廣泛使用的方法之一,,廣泛用于糖,蛋白質(zhì),,核酸,,酶等的快速定量檢測

超微量分光光度計的光譜范圍

包括波長范圍為380~780 nm的可見光區(qū)和波長范圍為200~380 nm的紫外光區(qū)。不同的光源都有其*的發(fā)射光譜,,因此可采用不同的發(fā)光體作為儀器的光源,。

   鎢燈的發(fā)射光譜:鎢燈光源所發(fā)出的380~820nm波長的光譜,光通過三棱鏡折射后,,可得到由紅,、橙、黃,、綠,、藍(lán)、靛,、紫組成的連續(xù)色譜,;該色譜可作為可見光分光光度計的光源。

   氘燈的發(fā)射光譜:氘燈能發(fā)出190~400 nm波長的光譜,,可作為紫外光光度計的光源,。  氙氣閃光燈的發(fā)射光譜:氙燈能發(fā)出200~850 nm波長的光譜,可作為紫外-可見光光度計的光源,。電源體積較小,,采用脈沖閃光方式工作,閃光次數(shù)可達(dá)109次,,壽命相對氘燈和鎢燈較長,。

物質(zhì)的吸收光譜

如果在光源和棱鏡之間放上某種物質(zhì)的溶液,此時在屏上所顯示的光譜已不再是光源的光譜,它出現(xiàn)了幾條暗線,,即光源發(fā)射光譜中某些波長的光因溶液吸收而消失,,這種被溶液吸收后的光譜稱為該溶液的吸收光譜。

不同物質(zhì)的吸收光譜是不同的,。因此根據(jù)吸收光譜,,可以鑒別溶液中所含的物質(zhì)。    

原理

當(dāng)光線通過某種物質(zhì)的溶液時,,透過的光的強(qiáng)度減弱,。因為有一部分光在溶液的表面反射或分散,一部分光被組成此溶液的物質(zhì)所吸收,,只有一部分光可透過溶液。

入射光 =  反射光 + 分散光 + 吸收光 + 透過光

        如果我們用蒸餾水(或組成此溶液的溶劑)作為“空白”去校正反射,、分散等因素造成的入射光的損失,,則:

入射光 = 吸收光 十 透過光

 分光光度計進(jìn)行樣品濃度測定的原理是根據(jù)朗伯-比爾(Lambert-Beer)定律,

A = ε b c

    其中,A ——為物質(zhì)的吸光度,;

              ε——為物質(zhì)的吸光系數(shù),;

               b——為光路長度(光程);

               c——為物質(zhì)的濃度,。

 

 

以上就是上海金鵬分析儀器有限公司為大家整理總結(jié)關(guān)于超微量光度法的定義與應(yīng)用,。

 

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