一、擴(kuò)增流程
收到產(chǎn)品后,，請先根據(jù)產(chǎn)品管壁標(biāo)簽來判斷產(chǎn)品形式,，并在擴(kuò)增前準(zhǔn)確查找該質(zhì)粒菌株的抗性、感受態(tài)和培養(yǎng)溫度,。
1,、質(zhì)粒干粉（常溫運輸，存于-20度,，90天保質(zhì)期,，請務(wù)必轉(zhuǎn)化挑單克隆培養(yǎng),，不要直接使用和測序）
①收到質(zhì)粒干粉后請先5000rpm離心1min,，再加入20μl ddH2O去離子水溶解質(zhì)粒,；
②取1支100μl 感受態(tài)于冰上解凍10min，加入2μl質(zhì)粒,，再冰浴30min后,，42℃熱激60s，不要攪動,，再冰浴2min,；（從第二步開始均要在超凈工作臺中無菌操作）
③加入900μl無抗的LB液體培養(yǎng)基，180rpm震蕩37℃培養(yǎng)45min,；
④6000rpm離心5min,，僅留100μl上清液重懸細(xì)菌沉淀，并涂布至目標(biāo)質(zhì)?？剐缘腖B平板上,；（可使用本平臺的平板涂布專用玻璃珠進(jìn)行涂布，可以比傳統(tǒng)涂布方法獲得更多轉(zhuǎn)化子）
⑤將平板正向培養(yǎng)1h,，再倒置37℃培養(yǎng)14h,。如果要求是30度則培養(yǎng)20h；
（菌落過多則將質(zhì)粒稀釋后再轉(zhuǎn)化,。沒有菌落則加入10μl質(zhì)粒轉(zhuǎn)化,。另不要直接轉(zhuǎn)表達(dá)感受態(tài)，要先轉(zhuǎn)克隆感受態(tài),，重提質(zhì)粒后再導(dǎo)入表達(dá)感受態(tài)）
⑥挑取單菌落至LB液體培養(yǎng)基中,，加入對應(yīng)抗生素，220rpm震蕩培養(yǎng)14h,，根據(jù)實驗需要和質(zhì)粒提取試劑盒說明書提取質(zhì)粒,。
2、甘油菌種（冰袋運輸,，存于-80℃,，保質(zhì)期90天，請務(wù)必劃線挑單克隆培養(yǎng)）
四區(qū)劃線后挑單菌落培養(yǎng),，酵母菌需要先液體復(fù)蘇再四區(qū)劃線,，再挑單菌落液體培養(yǎng)。
3,、穿刺菌種（冰袋運輸,，存于4℃，保質(zhì)期7天）
穿刺接種,，液體培養(yǎng)后四區(qū)劃線,，再挑單菌落液體培養(yǎng)。
4,、菌落平板（冰袋運輸,，存于4℃,，保質(zhì)期7天）
直接挑取單菌落至液體培養(yǎng)基中。
5,、液體質(zhì)粒（冰袋運輸,，存于-20℃，保質(zhì)期90天）
單獨提取的液體質(zhì)粒收到后可直接使用,。
6,、濾紙質(zhì)粒（常溫運輸，存于-20度,，90天保質(zhì)期,，請務(wù)必轉(zhuǎn)化挑單克隆培養(yǎng)，不要直接使用和測序）
收到貨后將濾紙畫圈部分剪下放入EP管中,，加100ul無菌水將濾紙浸濕并浸泡5min,，吸取5ul質(zhì)粒轉(zhuǎn)化，離心全涂,。


二,、轉(zhuǎn)化圖片