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UHPLC反相色譜柱是一種具有*碳載量的固定相,。高碳鏈覆蓋度使其具有密集的鍵和優(yōu)異的形狀選擇性,，在PH低至1的環(huán)境中仍能保持良好的穩(wěn)定性,。它主要應(yīng)用于傳統(tǒng)的C18柱無(wú)法分離的類(lèi)胡蘿卜素的異構(gòu)體和其他長(zhǎng)烴基物質(zhì)的分離,。
UHPLC反相色譜柱的使用：
在使用前，進(jìn)行柱的性能測(cè)試,，并將結(jié)果保存起來(lái),，作為今后評(píng)價(jià)柱性能變化的參考。在做柱性能測(cè)試時(shí)要按照出廠報(bào)告中的條件進(jìn)行,，只有這樣,，測(cè)得的結(jié)果才有可比性。但要注意：柱性能可能由于所使用的樣品,、流動(dòng)相,、柱溫等條件的差異而有所不同,。
UHPLC反相色譜柱的操作方式：
1,、在條件允許情況下，在使用前對(duì)新色譜柱按照說(shuō)明書(shū)方法進(jìn)行柱效測(cè)試,。以確保色譜柱的正常,。
2、所有硅膠基質(zhì)色譜柱使用溫度應(yīng)低于60℃,。
3,、樣品
將樣品溶解在流動(dòng)相或極性相近的溶劑中。如果使用梯度洗脫,，則需要將樣品溶解在初始流動(dòng)相或極性相近的溶劑中,。樣品溶液不應(yīng)含有任何顆粒物，使用0.5μm或更小粒徑的濾膜過(guò)濾,。樣品溶液如果使用強(qiáng)溶劑（例如,，流動(dòng)相為水,，樣品溶劑為甲醇），為達(dá)到較好峰形,，需要降低進(jìn)樣量（以250x4.6mm規(guī)格為例,，小于10μL）。
4,、流動(dòng)相
所有流動(dòng)相,，特別是含有緩沖鹽的流動(dòng)相，當(dāng)日實(shí)驗(yàn)當(dāng)日配制,；如果使用了前日配制的流動(dòng)相,，請(qǐng)確保流動(dòng)相pH值沒(méi)有變化，并確保流動(dòng)相沒(méi)有長(zhǎng)菌,。流動(dòng)相的pH值取決于您的應(yīng)用和色譜柱填料類(lèi)型,。
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