正在進(jìn)行“戰(zhàn)斗”的CAR-T細(xì)胞

由于CAR-T能夠定向治療疾病,，又被稱作給患者“活的藥”,。目前CAR-T治療只是用于少量臨床實(shí)驗和晚期血癌的患者治療。由于其它的治療方案都已經(jīng)沒有辦法時,，CAR-T的顯著效果這都引起研發(fā)人員和公眾的關(guān)注,，這些患者中包括成人和孩子。2017年,，CAR-T治療被美國FDA批準(zhǔn)應(yīng)用于孩子急性淋巴細(xì)胞白血病和成人晚期細(xì)胞癌,。由于T細(xì)胞采取患者本身體內(nèi)，不會產(chǎn)生免疫系統(tǒng)的抗性,，因此幫忙患者進(jìn)行治療疾病,。

CAR-T治療流程

標(biāo)準(zhǔn)的CAR-T治療流程主要分為以下七個步驟進(jìn)行（整個療程持續(xù)5周左右）：

1.評估病人是否符合CAR-T治療的適應(yīng)癥

2.分離T細(xì)胞：通過外周血血細(xì)胞分離機(jī)從腫瘤病人血液中分離出單個核細(xì)胞，進(jìn)一步純化T細(xì)胞,。

3.改造T細(xì)胞：用基因工程技術(shù),，把一個含有能識別腫瘤細(xì)胞且激活T細(xì)胞的嵌合抗原受體的病毒載體轉(zhuǎn)入T細(xì)胞，即把T細(xì)胞改造成CAR-T細(xì)胞,。

4.擴(kuò)增CAR-T細(xì)胞：在體外培養(yǎng)以大量擴(kuò)增CAR-T細(xì)胞,。一般一個病人需要幾千萬，乃至幾億個CAR-T細(xì)胞,，體重越大,，需要細(xì)胞越多。

5.CAR-T細(xì)胞回輸入人體：把擴(kuò)增好的CAR-T細(xì)胞通過靜脈回輸?shù)讲∪梭w內(nèi),，開始進(jìn)行腫瘤細(xì)胞免疫治療,。

6.監(jiān)控反應(yīng)：嚴(yán)密監(jiān)護(hù)病人身體反應(yīng),，尤其是細(xì)胞輸入體內(nèi)后一至兩周內(nèi)可能發(fā)生劇烈不良反應(yīng)。

7.評估治療效果：多在回輸CAR-T細(xì)胞后第15天和第30天評估對原發(fā)病的治療效果,。

目前研究學(xué)者正在為其他類型的CAR-T治療,，即通用型CAR-T細(xì)胞。在采集過程中,，T細(xì)胞不是來自患者,，而是取自已經(jīng)治愈的患者體內(nèi)。這樣就不用針對每個病例,，而單獨(dú)進(jìn)行培養(yǎng)各自的CAR-T細(xì)胞,。通用型CAR-T療法則可以對異體T細(xì)胞進(jìn)行提前制備,，隨時提供給患者,。此外，它也不受患者自身T細(xì)胞質(zhì)量的影響,。但它還是一個新興領(lǐng)域,，人們對CAR-T細(xì)胞治療的科學(xué)認(rèn)識尚有許多需要解決的問題。

相關(guān)操作

1,、血液中的白細(xì)胞有五種,按照體積從小到大是:淋巴細(xì)胞,嗜堿性粒細(xì)胞,嗜中性粒細(xì)胞,嗜酸性粒細(xì)胞和單核細(xì)胞,。然后采用連續(xù)或者半連續(xù)的密度梯度離心的方法，再經(jīng)過磁珠法進(jìn)行細(xì)胞富集,。

程序控制離心機(jī)

2,、通過分子生物學(xué)操作，讓質(zhì)粒攜帶CAR基因,，大量擴(kuò)增質(zhì)粒的目的是擴(kuò)增CAR基因,，用于轉(zhuǎn)導(dǎo)使用。其中質(zhì)粒是細(xì)菌,、放線菌等生物中染色體（或擬核）以外的DNA分子,，存在于細(xì)胞質(zhì)中（但酵母除外，酵母的2 μm質(zhì)粒存在于細(xì)胞核中）,，具有自主復(fù)制能力,，使其在子代細(xì)胞中也能保持恒定的拷貝數(shù)，并表達(dá)所攜帶的遺傳信息,，是閉合環(huán)狀的雙鏈DNA分子,。

恒溫振蕩培養(yǎng)箱

3.用貼壁細(xì)胞和懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，通過病毒轉(zhuǎn)染細(xì)胞的方法生產(chǎn)目的病毒,。

滾瓶培養(yǎng)用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)

培養(yǎng)箱用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)